胸膜肺炎放线杆菌ApxⅠ、ApxⅢ和ApxⅣ的截短表达及免疫反应性鉴定

于栋，祝可心，安家慧，叶洋，李玉峰

(南京农业大学动物医学院/农业农村部动物细菌学重点实验室，江苏 南京 210095)

猪传染性胸膜肺炎是猪的一种呼吸系统急性接触性传染病，临床症状包括高烧、咳嗽和流鼻涕[1]。该病各年龄阶段的猪群均易感，发病率在10%以上，最急性型死亡率可达80%～100%，从急性和慢性感染中康复的猪可以持续排出病原体而没有临床症状，因此难以控制和根除[2-4]。自1957年发现以来，猪传染性胸膜肺炎对各国生猪产业造成了巨大的经济损失[5]。胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae，APP)属于巴氏杆菌科、放线杆菌属，是一种革兰阴性短杆状细菌，是猪传染性猪胸膜肺炎的重要致病因子[1]。APP共有15种血清型，不同血清型间交叉保护性低[5-6]。APP能够产生多种毒力因子，包括溶血外毒素(Actinobacilluspleuropneumoniae-RTX-toxins，Apx)、外膜蛋白、脂多糖、转铁结合蛋白、荚膜、菌毛等[7]，其中 Apx被认为是APP最重要的毒力因子。目前已经发现的Apx有ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ和ApxⅣ[8]，其中ApxⅠ有较强的溶血活性；ApxⅡ溶血活性较弱[9]；ApxⅢ有强细胞毒性，不具有溶血活性[10]；ApxⅣ由所有APP血清型在感染猪体中产生，但在体外培养条件下不产生[2]，由大肠杆菌表达的产物有较弱溶血活性[11]。与此同时，Apx也是APP主要的免疫原，在针对APP的各种疫苗中，使用ApxⅠ、ApxⅡ和ApxⅢ的重组蛋白作为疫苗抗原制备的亚单位疫苗在保护性方面显示出良好的功效：马艳芳[12]研究提取ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ毒素，发现其在猪传染性胸膜肺炎的免疫保护过程中具有一定作用；周家强[9]将ApxⅡ A蛋白纯化后免疫小鼠，三免后发现其抗体效价明显提升，并且通过动物试验证明ApxⅡ A蛋白在一定程度内能够增强灭活苗的免疫效果；……