不同地域中药蕲蛇多糖含量测定及抗肿瘤作用初步研究

郭 欣 王 维

蕲蛇为蝰科动物五步蛇Agkistrodon acutus（Güenther）的干燥体，具有祛风，通络，止痉等功效，用于风湿顽痹，麻木拘挛，中风，半身不遂，抽搐痉挛，破伤风，麻风疥癣[1]。蕲蛇主要含有氨基酸、骨胶原、脂肪、多糖等成分[2]，药理研究显示，其具有抗炎、镇痛、抑制肿瘤活性和杀死癌细胞的作用[3]。目前以中药蕲蛇组方而成复方制剂金龙胶囊、消癌片、解热除毒丸等在癌症治疗过程中发挥积极疗效，但是由于对蕲蛇研究的不足，其主要的抗肿瘤活性成分并未明晰[4-5]。本研究前期已经分离出蕲蛇多糖和蛋白类成分，多糖类成分在抗肿瘤方面取得很好的效果。蕲蛇蛋白类的成分对肝癌Hep G2、肺癌A549、H1299、白血病KG-1、MEC-1 等在内的多种细胞株有很好抑制作用[6-7]。但是对于动物蛋白、多糖类成分的提取相对困难，且得率较低。因此，我们应用前期建立的适用于中药蕲蛇中多糖含量测定方法，对不同地域的蕲蛇含量的多糖进行测定，比较不同地域蕲蛇多糖含量，并初步探讨其抗肿瘤作用。

1 材 料

1.1 仪器与试剂 UV-2600 紫外分光光度计（岛津公司）、旋转蒸发器-2000 型（上海雅荣生化仪器设备有限公司）、KQ2299DV-超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）、电子分析天平（瑞士梅特勒）、LD4-2A 离心机（北京医用离心机厂）。葡萄糖（中国药品生物制品检定所，供含量测定用）、苯酚（国药集团化学试剂有限公司）、浓硫酸（纯度：98.08%，国药集团化学试剂有限公司）、蒸馏水（MILL-Q 纯水仪制备），其他试剂均为分析纯，购于北京化工厂。噻唑蓝（MTT）（批号B0275）、悬浮细胞培养基1640（RPMI-1640）购自Sigma 公司，改良Eagle 培养基（DMEM）购自Sigma 公司（批号ATCC30-2002）。……