阿法替尼抗小鼠肺炎支原体感染的效果研究

(1. 南华大学公共卫生学院, 湖南省衡阳市 421001；2.南华大学衡阳医学院，湖南省衡阳市421001；3.武汉轻工大学生物与制药工程学院，湖北省武汉市 430023)

肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,Mp)可引起儿童或青少年急性呼吸道感染，常伴间质性肺炎。少数患者因Mp过度免疫应答引发严重肺损伤，如肺脓肿、坏死性肺炎、急性呼吸窘迫综合征等，严重者可危及生命[1-2]。此外，慢性持续性Mp感染可诱发哮喘[3-4]，脑膜脑炎[5]等并发症，其诱发机制尚在研究中[6]。近年来，儿童难治性支原体肺炎(持续性Mp感染)病例日趋增多，且死亡病例逐年增加[7]。在中国约超过70% Mp临床分离株对大环内酯类抗生素耐药[8]，加大了Mp感染患者的治疗难度[9]。因此，研究新型抗Mp感染的有效药物具有重要意义。

临床应用的阿法替尼(Afatinib,BIBW-2992，2013年上市)属于不可逆ErbB家族阻滞剂[10]，是一种酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)，可靶向抑制肺癌、胰腺癌、结肠直肠癌、头颈部鳞状细胞癌等肿瘤的发展[11]。此外，阿法替尼与DMSO联用可有效杀灭革兰阴性菌如大肠杆菌，并可对细菌胞外聚合物基质进行化学修饰，从而显著降低其生物膜的形成[12]。本研究拟通过体内外实验评价阿法替尼抗Mp感染的效果。

1 材料和方法

1.1 实验试剂

肺炎支原体Ⅰ型标准株M129(ATCC29342)由昆明医科大学馈赠；阿法替尼(Afatinib，CAS 850140-72-6)(图1)由武汉轻工大学生物与制药工程学院提供，纯度≥98.0%；活性氧(reactive oxygen species，ROS)检测试剂盒购自上海翊圣生物科技有限公司；细胞因子ELISA试剂盒购自上海恒远生物科技有限公司。

图1 阿法替尼化学结构式(C24H25ClFN5O3)

1.2 Mp培养

将Mp M129株接种到PPLO液体培养……