黄 乾,廖世杰,林成森,刘 云,李波香,陈县祥,刘建宏,丁晓飞*
(广西医科大学第一附属医院a:骨科;b:广西再生医学研究中心,广西南宁530021)
骨肉瘤是最常见的原发性骨肿瘤,儿童、青少年 好发[1]。骨肉瘤是高度侵袭性和破坏性的肿瘤,疾病早期易发生周围的骨骼和血管转移[2]。虽在应用新辅助化疗后,非转移性骨肉瘤患者的生存率有一定改善,但复发或转移患者5年生存率仍低于33%;并且常规化疗常存在严重副作用[3~5]。而近20年来骨肉瘤患者的长期生存时间并没有明显的提升[6]。
雌激素可通过调控成骨细胞凋亡来维持骨密度稳定[7]。有研究表明,17β-雌二醇(E2)对骨肉瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡具有调控作用[8]。但长期或大量应用雌激素会带来副作用。分子研究表明,植物雌激素在结构上类似于17β-雌二醇(E2),并且可以结合和激活细胞内雌激素受体,只引起轻微副作用[9]。植物雌激素可抑制多种肿瘤细胞[10]。鹰嘴豆芽素A(biochanin-A,BA),是源于豆科植物鹰嘴豆、红车轴草等的一种异黄酮,具有类雌激素作用[11]。鹰嘴豆芽素A具有多种药理作用。然而,其对人骨肉瘤细胞的作用研究中较少涉及。本项研究主要探索鹰嘴豆芽素A对MG-63人成骨肉瘤细胞的细胞毒性作用及诱导凋亡机制。
1.1.1 细胞培养
MG-63细胞购自中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所细胞库。MG-63细胞使用含10%胎牛血清、1%100 U/ml青霉素和100 U/ml链霉素(四季青,杭州,中国)的高糖DMEM(Gibco,Life Tech⁃nologies,美国)培养基,置于37℃、5% CO2温箱中培养,使用Trypsin+EDTA消化传代。……