干扰海马spastin表达通过抑制突触传递介导小鼠认知功能障碍*

李志坤，祝 玮，王晗婕，郑雪峰，郭国庆，张吉凤

（暨南大学基础医学与公共卫生学院解剖学系，认知与发育障碍神经科学创新实验室，广东广州510632）

SPAST是遗传性痉挛性截瘫（hereditary spastic paraplegia，HSP）的致病基因，约有40%的HSP系由SPAST基因突变所致［1-2］。单纯型HSP患者神经系统的主要病理改变为皮质脊髓束的退行性变，表现为双下肢的痉挛性瘫痪［3］；而复杂型HSP常伴有认知功能异常，包括学习记忆减退和注意力缺陷等不同程度的认知障碍［4-5］。认知功能障碍发生的原因是什么，是否与SPAST编码的spastin蛋白的功能缺失有关？spastin是AAA型ATP酶活性的蛋白，主要功能是把微管切割成短的片段，以释放微管的动力［6］，除了AAA型ATP酶结构域，spastin的N端还具有一个疏水的HR结构域，以及MIT和MTBD结构域，MTBD负责把spastin锚定于微管，而MIT结构域则参与细胞内膜管的形成和物质的转运［7］。我们前期研究显示，spastin的MIT结构域能够与AMPA受体结合，参与谷氨酸能受体的转运［8］，从而改变培养神经元的树突棘可塑性，提示spastin介导的AMPA受体转运功能可能与认知功能障碍有关。为了验证我们的推测，本研究特意干扰小鼠海马部位spastin蛋白的表达，用膜片钳技术检测突触传递的功能，并评估小鼠的行为学表现，借以明确spastin是否参与小鼠认知功能的调控。

材料和方法

1 动物

SPF级C57BL/6小鼠，雄性，4周龄，15～17 g，购于辽宁长生生物技术股份有限公司，许可证号：SYXK（辽）2020-0001。分笼饲养，自由饮水食，控制环境温度（24±2）℃，相对湿度（50±10）%，昼夜交替时间为8：00与20：00。动物实验均遵照《中华人民共和国实验动物管理条例》，并通过暨南大学伦理委员会审查批准。……