草鱼胰蛋白酶的亲和纯化及酶学性质

李 晨，高柳芳，崔晓东，韩宇航，朱丹旭，李 娇,*

（1.山西大学生命科学学院，山西 太原 030006；2.山西大学生物技术研究所，山西 太原 030006）

胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白水解酶，是目前应用最广泛的蛋白酶之一，其应用范围遍布于食品（面包烘烤业、果品加工业、面粉深加工等）、纺织、饲料、发酵、洗涤剂、皮革、医药以及能源开发、环境保护等行业[1]。然而传统的分离蛋白酶方法主要依据目的分子的大小、溶解度及带电荷情况等，特异性很差，不仅纯化过程费时费力，而且酶的比活力和总活力回收不理想[2]，难以满足市场需求。亲和层析具有特异性强、高效、操作简单等多种优势，是目前纯化生物酶的首选方法。

目前虽然有牛和猪来源的胰蛋白酶已经商业化，然而，胰蛋白酶在自然界很多物种中普遍存在，其性质不尽相同，可用于不同领域。近些年来鱼类养殖业发展迅速，渔业生产方式已经由传统的捕捞转变成以养殖为主，我国水产品总产量多年以来一直居于世界首位[3]，鱼类加工规模不断扩大。然而鱼的内脏目前还没有得到充分利用，很多时候被当作废弃物扔掉，这样既不利于环境保护，又使得渔业资源大量浪费[4]。鱼内脏是鱼加工的主要副产品之一，其中含有丰富的油脂、蛋白质、复合酶等物质，且具有很高的生理活性和营养价值[5]。目前，鱼内脏的利用途径主要包括鱼油的精制（提取DHA和EPA），如鱼子用于制成保健品或美容护肤品，鱼肝用于治疗恶性贫血，鱼肠内的大量消化酶制成酶制剂等[6]。……