lncRNA LINC00339靶向miR-520a-3p对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响

李倩，刘丹彤，姚海荣，齐冰丽

(沧州市中心医院 妇产科，河北 沧州 061000)

卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于宫颈癌和子宫癌，患者生存预后较差[1]。目前临床上主要采用手术结合放疗和化疗等综合方案治疗卵巢癌，但是治疗效果不令人满意。深入分析卵巢癌的发病机制，并开发出新的治疗靶点有重要意义[1]。长链非编码RNA(long noncoding RNA，lncRNA)是长度超过200个核苷酸且不编码蛋白质的RNA，广泛存在于真核细胞转录组中，在表观遗传学调控中发挥重要作用[2]。既往研究证实，lncRNA在肿瘤细胞增殖、分化、凋亡、侵袭、迁移和细胞周期的调控中起到重要作用。近年来，lncRNA在卵巢癌诊断和治疗中的作用引起了广泛重视[3]。LINC00339是新发现的一种lncRNA，在乳腺癌、胃癌、肝细胞癌和胶质瘤中表达水平升高[4-7]。LINC00339在卵巢癌中的作用及其机制既往少有报道。miR-520a-3p在肿瘤中可能发挥抑癌基因作用[8-9]。本课题组前期用Target Scan软件预测到微小RNA(microRNA，miRNA)-520a-3p可能是LINC00339的靶基因。本研究分析LINC00339对miR-520a-3p的靶向调控作用，并分析其对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响，旨在阐明LINC00339在卵巢癌中的生物学意义。

1 材料与方法

1.1 细胞和试剂

卵巢癌细胞系(SKOV3、A2780、OVCAR3、HO-8910)和正常卵巢上皮细胞系(HOSEpiC)均购于中国科学院上海细胞库。胎牛血清和RPMI-1640培养基购于广州硕恒生物科技有限公司；LipofectamineTM2000试剂购于美国Sigma公司；sh-LINC00339、anti-miR-520a-3p、miR-520a-3p mimics、pcDNA3.1-LINC00339及其对照质粒均购于美国Invitrogen公司；引物由苏州泓迅生物科技股份有限公司设计并提供；双荧光素酶报告基因检测试剂盒、四甲基偶氮唑盐比色(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)试剂盒、Transwell小室、十……