电项针干预对急性脑出血大鼠Nrf2、NQO1表达和神经功能的影响∗

张晓辉 沈诗彦 柳依江 邵文娜 崔 海△

（1.首都医科大学，北京 100069；2.浙江省杭州市杭州种福堂中医医院，浙江 杭州 310011；3.山东中医药大学，山东 250000）

急性脑出血（ICH）属于中医学“中风病”范畴，占所有中风病的10%～15%，发病率和死亡率较高，存活率随着发病时间延长逐渐降低且存活者往往有重度残疾，给家庭和社会带来了沉重负担［1-2］。对于脑出血继发性脑损伤的病理机制，目前研究主要集中在脑出血后血脑屏障破坏、脑水肿、炎症反应、氧化应激、细胞凋亡等方面［3］。脑出血后，体内积聚的自由基增多和清除自由基的能力下降使其氧化与抗氧化稳态失衡，造成了氧化应激损伤。核因子E2相关因子2（Nrf2）通路是调节氧化应激的重要通路［4］，可上调NAD（P）H醌氧化还原酶1（NQO1）和血红素加氧酶-1（HO-1）等抗氧化酶的表达，抑制氧化反应，达到神经保护作用［5］。本实验通过观察脑出血急性期大鼠脑组织中Nrf2、NQO1的表达情况来探讨电项针干预对脑出血继发性脑损伤的治疗效果。

1 材料与方法

1.1 实验动物

24只SPF级雄性SD大鼠，体质量280～320 g，购买于北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号SCXK（京）2016-0011，饲养环境温度为（23±2）℃，光照/黑暗周期为12 h/12 h，自由饮水、进食。

1.2 试剂与仪器

qPCR试剂盒（美国KAPA Biosystems），逆转录试剂盒（北京百奥莱博科技有限公司）。BCA Protein As⁃say Kit（北京Cwbiotech公司），蛋白裂解液（中国优科卓业生物公司），Protein ladder（北京Biomed公司），SDS（美国Sigma公司），APS（美国Amresco公司），TRIZOL（美国Invitrogen公司），HiFiScript cDNA第一链合成试剂盒（康为世纪，批号CW2582），HiFiScript cDNA Syn⁃thesis Kit（康为世纪，批号CW2569），兔抗Nrf2抗体（美国abcam公司，批号ab31163），兔抗NQO1抗体（美国abcam公司，批号ab34173），桌面数显脑立体定位仪（深圳RWD Life Science），华佗牌电子针疗仪（苏州医疗用品厂有限公司），高速冷冻离心机（Beckman公司），实时定量PCR仪（美国ABI）。……