地木耳中多糖的分离纯化工艺研究

何姗珊 张会香

（[1]梧州市食品药品检验所 广西·梧州 543099；[2]桂林理工大学化学与生物工程学院 广西·桂林 541004）

1 材料与方法

1.1 试验材料：试剂与主要仪器

可溶性淀粉、无水乙醇、正丁醇、氯化钠、葡萄糖、苯酚、氨水、磷酸、浓硫酸、氢氧化钠、氯仿、盐酸、考马斯亮蓝G250（以上用到试剂均为分析纯）；颗粒状活性炭（化学纯），广东达濠精细化学品公司；AB-8大孔吸附树脂，山东西亚化学工业有限公司；Cellulose DE-52填料。

洁净的玻璃层析柱（1.5 cm×30 cm）；数显恒温水浴锅（HH-S型），金坛市医疗仪器厂；高速万能粉碎机（FW100型），天津市泰斯特仪器有限公司；紫外可见分光光度计，上海傲谱分析仪器有限公司；循环水式多用真空泵（SHZ-Ⅲ型），上海亚荣生化仪器厂；旋转蒸发器（RE-2000A型），上海亚荣生化仪器厂；离心机（DL-5-B型），上海安亭；酸度计（PB-10型），赛多利斯科学仪器（北京）有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 地木耳多糖的提取

将干燥的地木耳利用高速万能粉碎机粉碎后干燥备用，准确称取10 g地木耳粉末，加入适量95%乙醇浸泡3 h，过滤后干燥滤渣，接着以60:1的液料比加入蒸馏水，混合均匀后于90℃中恒温水浴3 h，过滤后将滤渣继续重复浸提操作4次，合并滤液，用旋转蒸发仪将滤液浓缩至适当体积，加入约3倍体积的无水乙醇，在4℃下低温放置过夜。过夜后烧杯有白色絮状物出现，4500 rpm转速下离心20min，收集沉淀后烘干即得地木耳粗多糖约2.55 g。

1.2.2 多糖含量的测定及标准曲线的制作

准确吸取50 g/mL的葡萄糖标准溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6 mL，各加水补至2.0 mL，加入6%苯酚1.0 mL和浓硫酸5.0 mL，充分振荡均匀，马上加热10 min，冷却后于490 nm波长下测定吸光度。……