浅谈凯氏定氮法测定豆粕中氢氧化钾蛋白质溶解度的不确定度评定

□ 高敬芳 刘 广 刘 云 中粮东海粮油工业（张家港）有限公司

豆粕在生产过程中的加热程度常用蛋白质溶解度来表示。豆粕加热过度，赖氨酸会发生美拉德反应，降低蛋白质利用率；加热程度不够会导致豆粕过生，抗胰蛋白酶活性变高，影响蛋白消化。因此准确测定氢氧化钾蛋白质溶解度将为生产工艺改进提供可靠数据，从而降低豆粕营养损失率。

1 测量不确定度评定过程

1.1 检测原理与方法简述

检测原理及方法依据GB/T 19541—2017附录A方法[1-2]。

1.2 主要仪器

凯氏定氮仪，福斯Kjeltec8200；电子分析天平，赛多利斯BSA224S-CW（感量0.0001g）；滴定管，50mL数显滴定仪（A级）；离心机，奥豪斯FC5714；移液管：15mL。

1.3 数学模型

氢氧化钾蛋白质溶解度X（%）=

式中：V1—滴定豆粕样品消耗盐酸标液的体积，mL；V0—滴定空白消耗盐酸标液的体积，mL；c—盐酸标液的浓度，mol/L；0.014—每毫摩尔质量氮的克数；m—称样量，g；K—豆粕的换算系数为6.25；W1—豆粕溶解于0.2%KOH溶液中的粗蛋白质含量，%。

1.4 测量不确定度来源分析

盐酸标准溶液（c）标定试验引入的不确定度u（c）；称量豆粕质量（m）过程中引入的不确定度u（m）；半自动凯氏定氮仪测定过程中引入的不确定度u（v）；离心后用15mL移液管移取溶液过程中引入的不确定度u（移液管）。

1.5 测量不确定度的评定

1.5.1 盐酸标准溶液（C）标定试验引入的不确定度u(c)

1.5.1.1 0.1mol/L盐酸标准滴定溶液标定过程中重复测量引入的不确定度

盐酸标准滴定溶液标定过程中重复测量引入的不确定度属A类不确定度评定[5]，标定记录见表1。

根据试验结果，按A类评定测量重复性的标准不确定度。重复测量的平均值：0.1007mol/L，用平均值的标准偏差表示标准不确定度为u（c1），则u（c1）的计算公式见式（3）。……