柚皮素对甲状腺癌细胞凋亡、自噬的影响及其与AMPK/mTORC1通路的关系

张增岭，施杲旸，朱乃海，陈涛

（1.江苏省人民医院浦口分院 普通外科，江苏 南京 211899；2.江苏省人民医院 普通外科，江苏 南京 210029）

甲状腺癌是全世界最普遍的内分泌实体瘤类型之一，其发病率呈逐年增加趋势[1-2]。在大多数患者中，手术后进行放射性碘或观察治疗是有效的，但是其他罕见的甲状腺癌亚型患者的靶向治疗只能延长生存期，因此迫切需要寻找新型有效的治愈性药物用于甲状腺癌的临床治疗[3]。柚皮素（naringenin，NAR）是从柑橘类植物中提取得到的黄酮类化合物，具有抗炎、抗病毒和抗肿瘤等作用[4-5]。在急性白血病HL-60细胞中，NAR能够激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）诱导细胞自噬和凋亡[6]。此外，AMPK/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1（mammalian target of rapamycin complex 1，mTORC1）信号通路在调控细胞自噬和凋亡过程中至关重要[7-8]，但NAR对甲状腺癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其作用机制是否与AMPK/mTORC1途径相关尚不清楚。本实验旨在探索NAR对甲状腺癌细胞凋亡和自噬的影响，并初步探索其作用机制，以期为将NAR应用于甲状腺癌的临床治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验细胞甲状腺癌细胞株ACT-1 购自上海冠导生物工程有限公司，批号GD-C521997。

1.1.2 主要试剂和仪器AMPK 抑制剂（compound C）（杭州昊鑫生物科技股份有限公司，批号HY13418-1）；DMEM 培养基、噻唑蓝（MTT）试剂、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/ 碘化丙啶（Annexin V-FITC/PI）细胞凋亡检测试剂盒、RIPA 裂解液、ECL 发光液（北京Solarbio 公司，批号分别为11995、M8180、CA1020、R0010、PE0010）；绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1 轻链3（GFP-LC3）质粒试剂盒（上海远慕生物科技有限公司，批号AT-V192）；兔抗人AMPK、磷酸化AMPK（p-AMPK）、核孔……