王 凯,李 明,乔良伟,曲青山
(郑州人民医院 器官移植科, 河南 郑州 450003)
肾缺血再灌注损伤(renal ischemic reperfusion injury, RIRI)是指肾脏经历一定时间缺血再次恢复血流供应后,功能代谢障碍及结构功能破坏出现加重的现象,是影响肾移植术后移植物功能恢复和长期存活的重要因素[1-2]。白藜芦醇(resveratrol)是一种天然多酚类化合物,具有抗癌、抗感染、抗氧化、保护心血管和神经系统、免疫调节等生物学活性[3]。研究表明,白藜芦醇可治疗肾缺血再灌注损伤,对抗氧化应激和炎性级联反应,但其作用机制尚不清晰[4-5]。核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路是经典促炎信号传导途径,可激活并扩大机体炎性反应,加重缺血再灌注损伤[6-7]。本研究以NF-κB信号通路为切入点,观察白藜芦醇对肾移植大鼠肾损伤的改善作用,并探究其作用机制。
1.1.1 动物:SPF级SD大鼠70只,6周龄,体质量180~220 g,雌雄各半,北京维通利华实验动物技术有限公司。研究方案获郑州人民医院伦理委员会批准(20210003)。
1.1.2 试剂:白藜芦醇(纯度>98%,上海一基实业有限公司);超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所有限公司);Revert AidTMfirst Strand cDNA Synthesis Kit(Thermo Fisher Scientificals公司);引物(TaKaRa公司);IKK-α、IκB-α、p-IκB-α、NF-κB p65、GAPDH兔源单克隆抗体,羊抗兔二抗(CST公司);Marker(SMOBiO公司);RIPA裂解液、蛋白定量试剂盒、HE染色试剂盒、脱脂奶粉、ECL发光液、PVDF转印膜(北京索莱宝科技有限公司)。
1.2.1 大鼠的分组及处理:将大鼠分为假手术组、模型组(从阴茎背静脉注射125 U/mL的肾素0.5 mL,造成大鼠肾素化,结扎左肾动静脉,取出左肾,灌注4 ℃乳酸林格氏液至肾脏呈黄白色,置于器官保存盒备用。受……