高原肉鸡肺动脉平滑肌细胞的分离、鉴定及低氧对其增殖的影响

常振宇,董海龙 ,李家奎,吴庆侠*

(1.西藏农牧学院 动物科学学院，西藏 林芝860000;2.华中农业大学 动物医学院，湖北 武汉430070)

肉鸡肺动脉高压综合征 ( pulmonary arterial hypertension，PAH) 是由多病因所致的一种以肺动脉压力增高为特点的疾病或综合征，主要通过血管收缩、肺血管重构来诱发右心衰竭，直至腹水死亡[1]。肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)位于肺动脉血管内皮细胞下层，参与多种病理反应的发生发展过程，如高原缺氧、肉鸡腹水肺动脉高压综合征、自由基损伤、动脉粥样硬化等[2-4]。另外，肉鸡肺动脉血管内膜及中膜PASMCs的增殖、肥大可以诱导低氧性肺血管收缩和血管重构，且肉鸡PAH综合征形成过程中具有这一特征，国内外学者研究发现低氧应激在PAH血管重构中发挥关键作用[5-8]。因此探讨研究肺血管重构机制的关键环节就是体外培养PASMCs，因此需要建立PASMCs培养方法。虽然国内外关于人、鼠和猪等哺乳动物的PASMCs培养方法已建立培养体系，但目前有关高原缺氧条件下肉鸡PASMCs的体外培养的研究少有报道[9-11]。肉鸡PASMCs培养方法主要有组织贴块法和酶消化法两种，但酶消化法步骤繁琐，酶消化时间难掌控，所需胶原酶价格昂贵不经济，所需成本较高[12-15]。近年来的研究开始以PASMCs作为细胞模型来探讨PAH的分子机制[16]。本试验以高原肉鸡肺主动脉组织作为来源，通过N2诱导低氧条件下培养，并采用组织贴块培养法更为稳定可靠，为在体外细胞培养条件下研究低氧对PASMCs 增殖的机制提供参考，并为研究缺氧--肺血管重构--PAH发病机制及其他相关研究提供一定的科学依据。……