雷公藤甲素对人骨肉瘤细胞阿霉素耐药株的逆转作用及机制研究

高 峰，王秀会，夏胜利，周小小，易存国，付备刚，沈 超，王明辉

(上海健康医学院附属周浦医院 上海市浦东新区周浦医院，上海 201318)

骨肉瘤是青少年常见的骨恶性肿瘤，多发于10～16岁，具有恶性程度高和预后差的特点。2009年以前骨肉瘤患者的5年生存率仅为45.7%，随着新辅助化疗技术在骨肉瘤治疗中的应用，骨肉瘤患者的生命质量已得到较大提高[1]。新辅助化疗技术治疗骨肉瘤有两个显著弊端：①肿瘤细胞易迅速对化疗药物出现耐药；②多药耐药(Multidrug resistance，MDR)导致化疗药物效能降低[2]。研究[3]指出，P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)会将化疗药物从胞内泵出胞外，导致细胞毒药物浓度降低，单纯提高细胞毒药物浓度来应对MDR效果并不理想。因此，寻找能逆转MDR作用且毒副作用较小的化疗增敏剂对提高骨肉瘤的治疗效果具有重要意义。雷公藤草本具有抗炎、抗肿瘤和调节免疫等药理作用[4]。雷公藤甲素(Triptolide，TPL)是从雷公藤中提取的单体化合物，是雷公藤发挥活性的主要成分之一[5-6]。刘倩等[7]报道TPL可抑制肺小细胞肺癌细胞系A549增殖和诱导凋亡。惠璐璐等[8]证实TPL可提高K562/A02细胞对阿霉素(Adriamycin RD，ADR)的敏感性。因此，本研究探讨TPL体外给药对骨肉瘤细胞MDR效应的逆转作用及其可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 人骨肉瘤细胞株U2OS购自中科院上海细胞研究所；CCK-8试剂盒(批号：20170015)购自南京建成生物科技有限公司；实时定量PCR(qRT-PCR)试剂盒(批号：A1852)、罗丹明-123(Rh123，批号：G1124)购自普洛麦格(北京)生物技术有限公司；P-gp单抗(批号：557003)购自美国CST公司；磷酸化蛋白激酶B(p-AKT，批号：G1708)、人磷酸化磷酸肌醇3激酶(p-PI3K，批号：G1708)、多药耐药蛋白质1(MDR1)单抗(批号：55510)购自美国Abcam公司；……