乙型肝炎病毒S基因不同区域嵌合丙型肝炎病毒中和抗原表位病毒样颗粒实验研究

舒 放，王海峰，薛飞肖，吕海港

(1.西北大学附属医院 西安市第三医院检验科，陕西 西安 710018；2.西安交通大学附属红会医院麻醉科，陕西 西安 710054)

目前全球丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus，HCV)感染者约7100万人，慢性感染导致肝硬化和肝癌，甚至危及生命。近年来因受感染人口老龄化、口服抗病毒疗法广泛应用等原因，全球HCV流行率快速下降[1]，但某些国家和地区注射毒品流行的增加在某种程度上部分抵消了这一下降，导致新的HCV感染增加[2-5]，仅靠治疗仍不足以实现HCV感染的消除。由于获得治疗的机会有限、费用较高、耐药性、治愈后再感染等情况的存在，迫切需要制定预防HCV感染的有效措施，尤其是研发出广谱有效的疫苗来阻止全球HCV传播[6-7]。现有研究[8-10]表明疫苗在机体细胞免疫及体液免疫反应中能够表现出持久性的抗病毒作用。在控制和预防传染病方面，疫苗仍然是最具成本效益和最成功的干预措施[11]。病毒样颗粒(Virus like particle，VLP)是不含病毒遗传物质颗粒，形态结构与天然病毒相似的能自我装配的病毒空壳，因此不具备感染性，但具有很强的免疫原性和生物学活性，广泛应用于疫苗研究领域[12-13]。本研究利用乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)S基因具有装配VLP的特性，在其亲水区和氨基端区插入HCV串联中和表位抗原，通过定量测定乙型肝炎表面抗原(HBsAg)比较纯化浓缩后的VLP含量，为后期HCV VLP疫苗研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 真核载体pCI-neo、重组质粒pCI-HBS、pCI-NEmS、人胚胎肾细胞293T(HEK293T细胞)由唐都医院韦三华教授惠赠；DMEM培养液、胎牛血清(FBS)购于Gibco;Lipofectamine 2000®转染试剂购于Invivogen；……