HMGB1-TLR4和Müller细胞在视网膜血管生成中的作用*

孙玉莹 肖 欧 黄春雨

1.中山大学肿瘤防治中心防癌体检中心，华南肿瘤学国家重点实验室，广东 广州 510060；2.中山大学中山眼科中心，广东 广州 510060；3.中山大学肿瘤防治中心内镜中心，华南肿瘤学国家重点实验室，广东 广州 510060

许多视网膜新生血管相关病变如视网膜静脉阻塞、增殖型糖尿病性视网膜病变、早产儿视网膜病变等疾病都会对视力产生不可逆的损害[1]。高迁移率族蛋白1 (high mobility group box-1 protein, HMGB1)是一种核蛋白，在多种组织中均有表达，Toll样受体通过与HMGB1结合激活其信号转导通路，产生和分泌一系列细胞因子及抗微生物多肽等，参与多种生物学过程，其中包括血管生长过程[2]。HMGB1-TLR4信号通路也被证明在中枢神经系统的细胞凋亡和坏死中起重要作用[3]。视网膜是一种特殊的神经组织，由精确的神经元、胶质细胞网络和微血管网络排列而成。研究发现胶质细胞可能通过释放促血管生成介质(包括细胞因子、生长因子和蛋白酶)来诱导新生血管形成[4]。Müller细胞是视网膜中最主要的胶质细胞，它被活化的机制尚不明确。本研究主要通过视网膜荧光铺片、免疫荧光和PCR等实验方法，研究HMGB1-TLR4信号通路和Müller细胞在视网膜新生血管生成中的作用及其作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物及OIR模型的建立

2019年1月至2019年12月期间，购买新生SPF级C57BL/6J小鼠90只和新生SPF级TLR4基因敲除C57BL/6J小鼠50只。按照Smith等[5]报道的方法进行小鼠OIR模型的制备，将母鼠和出生后7天(P7)的C57BL/ 6J幼鼠及TLR4基因敲除幼鼠放置于氧浓度为(75±2)%的氧箱中饲养，5天后放回正常的氧环境中。……