携RGD靶向肽载紫杉醇高分子超声造影剂制备及其对乳腺癌细胞靶向能力、抗肿瘤效应评估

李娟，刘桂荣，秦颢诚，武俊

1连云港市第二人民医院，江苏连云港 222000；2连云港市第一人民医院；3大连医科大学附属第二医院

目前，乳腺癌的治疗方式以手术为主、放化疗等为辅；然而，传统抗肿瘤药物血药浓度不稳定，半衰期短，不良反应大，严重影响了其疗效。随着纳米技术研究的深入，靶向给药纳米粒系统在改善抗肿瘤药物不良反应和耐药性等方面具有独特优势。纳米粒通过高通透、高滞留效应实现肿瘤被动靶向［1］，同时在纳米粒表面修饰的靶向分子可以使其获得主动靶向能力，内部包载显像剂及药物可实现肿瘤的早期影像学诊断及可视化治疗。研究显示，αvβ3整合素受体在某些侵袭性肿瘤如乳腺癌、黑色素瘤等呈过表达，具有精氨酸—甘氨酸—天门冬氨酸（RGD）肽段的RGDfK可与其特异性结合，提高纳米粒的肿瘤主动靶向能力［2-3］。2018年7月—2020年6月，我们选用普通造影剂聚乳酸—羟基乙酸（PLGA）为成膜材料，采用双乳化法及碳二亚胺法制备携RGD靶向肽的载紫杉醇（PTX）超声造影剂，观察其体外对乳腺癌细胞的靶向能力、细胞杀伤效率及超声造影情况。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器 羟基端乳酸—羟基乙酸共聚物（PLGA-COOH，聚合比例75∶25）；PTX（上海源叶有限公司）；MES缓冲液（pH 5.5/8.0）、偶联活化剂（EDC、NHS）及荧光染料DiⅠ、DAPI（Sigma，美国）；FITC标记的RGDfK肽（武汉博士德生物工程有限公司）；人乳腺癌细胞MBA-MD-231（蚌埠医学院病理教研室提供）；VCY-500超声波处理器（上海标本模型厂）；M S2000激光粒度分析仪（Malvern，美国）；LSM 900激光共聚焦显微镜（ZEISS，德国）。

1.2 实验方法

1.2.1 靶向载药造影剂……