龙牙楤木组培苗的高效诱导研究

陈爱华，佟立君，冯磊*,宋金柱

(1.黑龙江省林业科学院牡丹江分院，黑龙江 牡丹江 157010；2.黑龙江省林业科学院，哈尔滨 150081；3.哈尔滨市丹青河实验林场，哈尔滨 154800)

龙牙楤木(Araliaelata(Miq.)Seem.)，是中国传统的食药兼用植物，多年生落叶小乔木或灌木，又名刺嫩芽、辽东楤木、刺老鸦等，属于五加科(Araliaceae)楤木属(AraliaLinn.)[1]。龙牙楤木嫩茎叶鲜嫩清香可食，含有多种氨基酸和人体必需的微量元素[2]；其根皮制药可用于治疗神经衰弱、风湿性关节炎、糖尿病、肝炎和慢性胃炎等疾病[3]，多年来深受国内和东南亚国家消费者的青睐。

目前国内外对刺嫩芽在药用成分的提取、药理作用和经济林营建几个方面，已经取得了很多的成果[5-6]。在组织培养方面，2011年由香玲等经过分化产生体细胞胚，继而萌发成体胚苗[7]，《龙牙楤木组织培养和快速繁殖的研究》[8]指出不同取材、培养方法及培养条件对愈伤组织的诱导率、增值率及再生率有显著影响。但是从前人的研究中[9]，不难看出，普遍添加的外源激素种类较多，步骤稍显复杂，不利于产业化生产。因而，本实验设计并优化龙牙楤木组培的新方案，力求简单快速，以克服龙牙楤木细胞工程育种技术的不足，为龙牙楤木苗木产业化生产提供技术基础。

1 实验材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 材料前处理。龙牙楤木萌动枝条采自黑龙江省林副特产研究所的10株优树，采集时间为2015年的3月上旬(10日)，室温水培3 d，每株树采3～5个顶芽，切下叶片、叶柄分类放入两瓶灭菌水中浸泡2 h。

1.1.2 外植体。取龙牙楤木幼嫩的叶片、叶柄用75 %酒精消毒30 s，冲洗一次后放入1 %次氯酸钠溶液消毒10 min，无菌水冲洗3 次，在超净台内的无菌培养皿中；……