正交试验优化马鞭草中马鞭草苷和戟叶马鞭草苷的水提取工艺

刘园园，崔柏宁，李棣华

(1.天津城市职业学院，天津 300250；2.天津中医药大学，天津 301617； 3.天津市南开医院，天津 300100)

马鞭草为马鞭草科植物马鞭草VerbenaofficinalisL.的干燥地上部分，具有活血散瘀、利水、退黄、截疟等功效，可用于治疗癥瘕积聚、痛经经闭、喉痹等症[1-2]。现代研究表明，马鞭草中马鞭草苷和戟叶马鞭草苷具有抗氧化、保肝、保护神经[3]、保护心脏及脑缺血[4]、抗炎[5]等多种作用。马鞭草野生资源丰富[6]，分布地较为广泛，可提取出具有多种功效的生理活性成分。因此，研究从马鞭草中提取马鞭草苷和戟叶马鞭草苷的工艺具有非常重要的价值。

1 仪器与材料

1260型高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；JA3003电子天平 (上海菁海仪器有限公司)；数显恒温水浴锅(金坛市科析仪器有限公司)；DHG-9240A烤箱；KDM型调温电热套(天津市静海县工兴电器厂)；马鞭草苷对照品(南京普仪生物科技有限公司)；戟叶马鞭草苷对照品(南京普仪生物科技有限公司)；娃哈哈纯净水 (杭州娃哈哈集团有限公司)；乙腈 (Fisher公司，色谱级)；磷酸 (TED公司，色谱纯)；其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 马鞭草苷和戟叶马鞭草苷测定方法的建立

2.1.1 色谱条件 色谱柱：Orca C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；检测波长：240 nm；柱温：30 ℃；流动相：乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B)；梯度洗脱：0～15 min，11%～13% A，15～17 min，13%～24%A，17～20 min，24%～12%A，20～25 min，12%A；体积流量：1 mL/min。

2.1.2 对照品溶液的制备 取马鞭草苷、戟叶马鞭草苷适量，分别精密称定，加甲醇制成含马鞭草苷0.61 mg/mL、戟叶马鞭草苷0.54 mg/mL的混合对照品溶液。

2.1.3 供试品溶液的制备 取马鞭草药材粉碎过40目筛，取粉末约0.5 g，精密称定，准确加入蒸馏水25 mL，置具塞锥形瓶中，称定重量，回流提取45 min，冷却至室温，再称定重量，用蒸馏水补足减失的重量，摇匀滤过，取续滤液，即得。……