2013年至2018年辽宁省柯萨奇病毒A10型分离株VP1区基因特征分析

张 倩， 于 伟， 周晓彤， 雷 露， 毛玲玲， 姚文清*

(1.辽宁省疾病预防控制中心，辽宁 沈阳 110005；2.大连医科大学 附属第一医院，辽宁 大连 116011)

手足口病(hand，foot and mouth disease，HFMD)是一种全球性的儿童常见急性传染病，由多种肠道病毒引起，多好发于5岁以下儿童。肠道病毒71型(Enterovirus 71，EV-A71)和柯萨奇病毒A16型(Coxsackievirus A16，CV-A16)是引起手足口病最主要的两个肠道病毒病原体。近些年来，由非EV-A71和非CV-A16的其他肠道病毒引起的手足口病病例逐渐增加[1]，尤其是柯萨奇病毒A10型(Coxsackievirus A10，CV-A10)发病率越来越高[2-5]，CV-A10病毒引起的手足口病暴发事件在芬兰和法国等地不断被报道[6-13]，在我国也有多个省市报道了由CV-A10引起的手足口病病例[4、9-10、14-16]，由其他肠道病毒引起的手足口病受到越来越多的关注。2013年至2018年辽宁省手足口病病例病原学检测结果显示，非EV-A71和非CV-A16的其他肠道病毒是辽宁省2013年至2018年的优势病原。本研究对辽宁省2013年至2018年分离到的CV-A10病毒进行VP1区基因特征分析。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本采集与处理 采集2013年至2018年辽宁省14个市送检的手足口病患者临床病例阳性标本18 013份，分别为咽拭子和粪便标本，其中非EV-A71和非CV-A16的其他肠道病毒临床标本9 431份，标本处理方法参照国家脊髓灰质炎和国家麻疹实验室发布的《手足口病实验室手册》(2010版)。

1.2 方法

1.2.1 病毒分离 将处理过的标本接种至密度为80%以上、形态良好的RD细胞上，35 ℃，5% CO2条件下培养，出现肠道病毒特异性细胞病变效应(cytopathic effect，CPE)，且CPE≥75%时，判定为病毒分离阳性，收集并于-70 ℃保存，如连续两代均不出现CPE则判为阴性。RD细胞为国家疾病预防控制中心脊髓灰质炎实验室提供。……