基于CRISPR/Cas9 的新冠病毒双基因检测试纸条

沈海聪， 朱 志

（厦门大学化学化工学院，福建厦门361005）

严重急性呼吸综合征冠状病毒2 （SARSCoV-2） 给全人类生命健康和公共医疗系统带来了严重威胁。 迄今为止，由于缺乏针对该病毒的有效药物和疫苗，快速、大规模的感染者鉴定对病毒的扩散控制有着重要意义。 SARS-CoV-2 的检测方法主要分为3 类： 胸部计算机断层扫描（CT），血清学检查和核酸检查。胸部CT 能够检测到患者的肺部病变，但它不能准确识别轻度肺部病变或无症状的患者，特异性不够。 血清学检测主要检测患者血清中的抗体，但受限于检测窗口期。 相比之下，即便在感染的初期，患者鼻咽拭子中的病毒滴度也比较高， 因此直接对病毒进行RNA 检测是比较推荐的[1]。 反转录定量聚合酶链反应（RT-qPCR）被认为是SARS-CoV-2 核酸检测的金标准。 然而，RT-qPCR 方法需要专用且昂贵的设备， 专业的操作以及较长的样品检测时间，不利于资源匮乏地区、学校、诊所和家庭的使用。 作为RT-qPCR 方法的有效补充，基于核酸恒温扩增的技术和CRISPR 技术的侧向层析试纸条可满足快速检测的需求[2]。 当前的研究大都只是针对单一的靶基因，这对临床的诊断是不够准确的。 最近，华南师范大学生命科学学院周小明教授课题组联合湖北省疾病预防控制中心，将Cas9/sgRNA 系统整合到已建立的生物传感平台中，通过胶体金试纸条对新冠病毒的E 和Orf1ab基因片段进行联合检测，以期获得更加可靠的检测结果[3]， 这一研究成果近期发表在Angew．Chem．Int．Ed．杂志上。

为了实现双基因检测的目标，他们首先设计了包括两条测试线（T 1 和T 2）和一条质控线（C）的胶体金试纸条（图a）。……