透明质酸酶对马鹿精子体外获能影响的研究

孙佳阳，崔 凯，马杨君，邹 琦，李和平*

（1.东北林业大学野生动物与自然保护地学院，哈尔滨 150040；2.青岛农业大学动物科技学院，山东青岛 266109）

哺乳动物精子受精前须在雌性动物生殖道内进行获能，然后才能获得受精能力，即精子获能(capacitation)[1-2]。哺乳动物精子获能现象的发现是动物体外受精研究的里程碑[2]。因而，诱导精子体外获能技术是体外受精必须首先解决的关键技术之一。

透明质酸酶（hyaluronidase）是精子细胞顶体内含有的一种溶酶体酶，它参与溶解含有透明质酸的卵丘，在精子受精过程中起着重要作用[3]。精子顶体位于精子头部前端，覆盖在精子核前面，是外包有单位膜的囊状结构[3]。顶体内含有多种蛋白水解酶、磷酸脂酶等，透明质酸酶便是其中的一种重要酶。当精子获能、发生顶体反应时，顶体释放使精子可以穿过卵细胞的放射冠、溶解含有透明质酸的卵丘，使卵泡周围的颗粒细胞分散，便于精子进入卵子内[2-4]。

马鹿是目前我国人工养殖的主要特种畜禽之一，探究其受精生物学机制的基础研究及其相关的体外受精技术具有重要科学意义与实践价值。但目前有关透明质酸酶对马鹿精子体外获能的研究很少。试验采集马鹿精子，开展了透明质酸酶对马鹿精子体外获能影响的研究，以期为马鹿体外受精实践提供基础的数据参考。

1 材料

1.1 精液来源

成年健康雄性种马鹿1头，来自黑龙江省农垦科学院哈尔滨特产所鹿场。以人工采精的方法采得马鹿新鲜精液，用无卵黄精液稀释液（Andromed®）稀释后，在0～4 ℃保存（不超过5 d）。……