杂交构树根际固氮菌的分离与特性研究

张 军，彭轶楠，郭 琪，王沛雅，李 鑫，杨 晖

(甘肃省科学院生物研究所，甘肃省微生物资源开发利用重点实验室，“特色微生物与植物资源创新”甘肃省国际科技合作基地，甘肃 兰州 730000)

构 树 (Broussonetia papyrifera(Linnaeus) L’Héritier ex Ventenat)是一种具有重要经济价值的多年生乔木，属于桑科（Moraceae）构属(Broussonetia)。根据Angiosperm Phylogeny Group III分类系统，又属固氮分支[1]。近年来，新品种杂交构树华构1号因抗逆性强、生长速度快、产量高、粗蛋白质含量高的优点，被用作优质的木本饲料来源在全国20多个省（市）推广种植；但在甘肃等西北干旱与半干旱地区，杂交构树的生长存在产量低、翌年返青率低等问题[2]。针对以上问题，研究人员一方面开展了选育适宜甘肃冷凉地区的高产抗寒性品系的工作；另一方面，鉴于研究表明杂交构树高含量的粗蛋白来源和速生可能与其内生和根际共生的共生固氮或联合固氮菌有密切关系[3]，可通过从杂交构树根际土壤中筛选本土固氮菌微生物再回接的方式，提高菌肥效果，达到增产的目的。因此，根据土壤环境情况分离筛选杂交构树优良固氮菌株，是研制菌肥最基础的前期工作。本研究旨在从甘肃地区种植的杂交构树根际分离筛选获得固氮菌株，并对其固氮、促生、溶磷、生物防治等功能进行研究，可为进一步开发甘肃地区杂交构树微生物氮肥提供菌种资源。

1 试验材料

1.1 样品

为便于研究，将根际分为远根土(距离根部1～10 cm的土壤）、根表土（距离根部0～1 cm的土壤）与根3个部位，于2019年8月在甘肃的天水（34°5′ N，105°82′ E）、兰州（36°0′ N，103°57′ E）和张掖（38°43′ N，100°40′ E）杂交构树种植试验区，按照蛇型采样法，各取5个点分别采样，现场混合后将根系样品和采用四分法保留的土壤样品装入无菌自封袋中运回实验室进行分离。……