消积抑癌方对Lewis肺癌荷瘤小鼠MMP-2的影响

郑 茜，刘远婷，丁甜甜，李 慧

(新疆医科大学第七附属医院中医科，新疆 乌鲁木齐830000)

肺癌是临床常见的一种癌症，在全球范围内肺癌的发病率及死亡率均居于首位[1]。我国肺癌在男性恶性肿瘤中发病率居首位，在女性恶性肿瘤中肺癌的发病率居于第二位[2]。目前临床常采用放化疗、手术、靶向治疗、生物治疗等多种综合方法治疗肺癌，以提高其疗效，但患者5年内的生存率仍<14%，且大部分患者发现时已处于晚期，已丧失手术治疗的机会，以姑息性治疗为主[3]。虽然治疗晚期肺癌临床常采用化疗治疗，但是化疗诱发的一系列毒副作用仍无法避免。近年来，随着中医药的不断进步，中医药在治疗肺癌中取得了重要的作用[4]。消积抑癌方具有化痰散结、益气扶正、清热解毒、活血消积、以毒攻毒之功效，且经笔者多年研究已证实消积抑癌方能够有效改善肺癌患者的临床症状，提高患者预后水平[5]。因此，本研究将消积抑癌方用于治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠，以观察消积抑癌方对Lewis肺癌荷瘤小鼠MMP-2的影响。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 动物与细胞：购于青岛实验动物中心(证书编号：SCXK2014-001)雄性6～8周的C57BL/6小鼠，SPF级，平均体重为(20±2)g，共100只雄性小鼠，实验动物使用许可证：SYXK(黑)2016004。购自美中国科学院上海生命科学研究所生产的Lewis肺癌细胞株。

1.1.2 药物：消积抑癌方，组方为当归、川芎、乳香、没药、红花、赤芍、甲珠、丹参各30 g，五灵脂60 g、仙鹤草、丹皮、白鲜皮、蛇莓、透骨草、青黛各60 g，莪术、苦参、山慈菇、商陆、延胡索、浙贝母、乌梅、蜂房各120 g，蜈蚣40条，全蝎、虫、拳参各40 g，冰片9 g。由新疆医科大学第七附属医院中药房提供。46°白酒500 ml(天池特曲浓香型46°)，将冰片溶入白酒中制备成冰片酒。将消积抑癌外用方中的药物用破壁机研成细粉,用46°白酒调和成膏状再消毒灭菌装瓶封制成的外敷制剂。消积抑癌内服方：将消积抑癌方加水煎煮二次，每次加10倍量水，提取2 h，滤过后合并滤液，制成5.25 g(生药)/ml，以上药品由我院提供。

1.1.3 试剂：苏州北纳创联生物技术有限公司生产的Hclone high glicose DMEM、胎牛血清、磷酸盐缓冲液(Phosphate buffered saline，PBS)；美国Gibco公司生产的胰蛋白酶(批号20150808225)；美国RD公司生产的血清MMP-2、VEGF、HIF-1α，ELISA试剂盒；南京建成生物工程研究所生产的血清IFN-γ、IL-10、TNF-α、IL-2试剂盒。……