维氏气单胞菌ΔexsA1减毒株对宿主免疫原性研究

盛强龙，徐一轲，刘超伦，李 宏，马 香，唐燕琼，刘 柱

（海南大学 生命科学与药学院，海口 570228）

维氏气单胞菌（Aeromonas veronii）是一种人鱼共患的革兰阴性病原菌[1]，其分布广泛、致病性较强，给水产养殖带来巨大的经济损失[2]。人感染后会出现菌血症、脑膜炎等症状，甚至有死亡的危险[3]。在革兰氏阴性菌中，III型分泌系统(Type III secretion systems, T3SS)通过分泌胞外蛋白和毒力蛋白介导毒力作用的发挥[4]，是细菌向宿主细胞分泌毒力因子的重要途径，如铜绿假单胞菌、沙门氏菌及福氏志贺菌对宿主的毒害作用皆由T3SS介导[5]。在急性感染期间，铜绿假单胞菌中T3SS特别活跃，感染者的死亡率增加[6-7]。T3SS在细菌病原体中十分保守，其表达由exoenzyme S transcriptional regulator ExsA激活[8]。在副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)中，HlyU正调控exsA基因启动子，激活T3SS的表达[9]；在铜绿假单胞菌中，ExsA可调控细胞外金属蛋白酶ImpA的表达，后者通过T3SS分泌到宿主体内后，可以裂解巨噬细胞表面蛋白CD44，以抑制巨噬细胞对细菌细胞的吞噬作用[10]。免疫球蛋白M（IgM）是一种普遍存在于脊椎动物中，由效应B淋巴细胞特异性分泌的免疫球蛋白[11-12]。根据Ig重链(heavy chain,H)恒定区的差异，硬骨鱼类被划分为IgM、IgD、IgZ/T、IgM和IgZ[13]等类型。在硬骨鱼中，IgM较其他类型的免疫球蛋白在含量上占绝对优势[14-15]，检测IgM成为判断特异性免疫形成的标志之一。

疫苗主要分为传统疫苗和基因工程疫苗。传统疫苗分为灭活疫苗和减毒活疫苗(live attenuated vaccine, LAV)，基因工程疫苗分为DNA疫苗、重组亚单位疫苗及活载体疫苗[16]。传统疫苗制备简易、成本较低、免疫效果优异，是市场主流。灭活疫苗较减毒活疫苗更加安全，且便于保存；……