circTCF25抑制mTOR信号通路对TNF-α诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

冯智明 尤宜洁 郝军舰

1青海红十字医院血管外科（西宁810000）；2青海省人民医院产科（西宁810000）

经皮腔内冠状动脉成形术（percutaneous intracavitary coronary angioplasty，PCA）是冠心病介入性治疗的重要手段，然而术后6 个月内支架内再狭窄发生率高达30% ～35%，严重影响冠状动脉介入治疗的效率和患者的生存质量［1］。血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell，VSMCs）是动脉壁的主要组成部分，研究显示，在内外环境刺激因子作用下VSMCs 发生表型转换触发内膜迁移并促进细胞增殖，是内膜增生、动脉壁变性和血管成形术后再狭窄的中心环节［2］。因此，抑制VSMCs 的异常迁移和侵袭可能是PCA后再狭窄的重要治疗策略。环状RNA（circular RNA，circRNA）是一类广泛分布的、具有共价闭合环状结构的内源性非编码RNA，参与基因表达调控，在心血管疾病进展中具有重要作用［3］。邹天宇等［4-5］通过circRNA 芯片、荧光定量PCR 对冠心病患者外周血单个核细胞中circRNA 表达谱进行分析和验证发现，circTCF25 表达水平显著降低，circTCF25表达增加与冠心病发病风险降低相关。在膀胱癌、骨肉瘤中circTCF25 高表达对肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭具有促进作用［6-7］。然而，关于circTCF25 对VSMCs 增殖和迁移的影响尚属空白。本研究以肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导大鼠VSMCs 建立体外增殖和迁移模型，重点探讨circTCF25 对VSMCs 增殖和迁移的作用，以期为PCA 后再狭窄提供有效治疗靶点。

1 材料与方法

1.1 实验材料大鼠胸大动脉平滑肌细胞A7r5、杜尔伯格伊戈尔培养基（dulbecco′s modified eagle medium，DMEM）、胎牛血清、青链霉素双抗购于武汉普诺赛生命科技有限公司；Lipofectamine 2000、TRIzol RNA 提取试剂盒、cDNA 合成试剂盒、SYBR Green I Master Kit 购于美国Invitrogen 公司；pcDNANC、pcDNA-circTCF25 购于上海生工生物公司；mTOR 激活剂MHY1485 购于湖北信康药化有限公司化学研究所；……