山兰种子无菌繁殖研究进展

牟涵 李书翔 杨洁婷 黄硕 赵佳鑫 张忠宝

摘 要：本文從外植体的消毒、培养基的选择、植物生长调节剂配方、种子萌发形态变化、防治褐化方法、外源添加物质等方面综述了目前山兰种子无菌繁殖的研究进展，并对未来山兰组织培养技术进行分析与展望。

山兰[Oreorchis patens（Lindl.）Lindl.]是兰科山兰属多年生草本植物，分布于我国西南、华中、西北、东北各地，日本、朝鲜半岛至西伯利亚也有分布，干燥球茎入药，甘、辛、寒、有小毒，具有滋阴清肺、化痰止咳的功效，用于痈疳、疮肿、瘰疬、无名肿毒[1]，亦作山慈菇入药[2]。目前自然条件下的山兰，只能利用其假磷球茎分生繁殖，繁殖系数低，每年只能分化出1～2子球[4]。难以满足市场的需求，而有性繁殖至今没有成功的报道。因此导致其商品价格上涨，野生资源遭到极大破坏。为实现山兰的集约化、规模化生产，提高繁殖系数、降低生产成本，不少学者开展了山兰组培繁殖的研究，为山兰的生产繁殖和野生资源的保护提供了重要的理论基础，具有重要的参考价值。

1 消毒方法

不同的外植体材料所选用的消毒方法和消毒时间不同。山兰种子通常的消毒步骤：洗衣粉浸泡5～10min，蒴果置于流水下冲洗数小时，后至少利用两种类型的消毒剂进行消毒、清洗。蒴果在清洗时应保证其完整性，破裂的蒴果不能作为实验材料。张正海等在研究关于山兰种子无菌萌发时[3]，流水浸泡蒴果8h，采用了75%的酒精和0.15%氯化汞组合进行蒴果的消毒处理，种子的萌发效果较好，污染低。……