PCR法对益生菌产品中双歧杆菌的鉴别

◎ 相红丽，雷红涛，黄惠英，付日留

（1.华南农业大学 食品学院，广东 广州 510642；2.合生元（广州）健康产品有限公司，广东 广州 510663）

益生菌是通过定殖在人体内改变宿主某一部位菌群组成的一类有益的活性微生物。通过调节宿主系统免疫功能或通过调节肠道内菌群平衡，起到促进营养吸收保持肠道健康的作用，被临床确认主要功效有：调节肠道菌群[1]、提高免疫力[2]、促进营养物质合成和矿物质的吸收[3]、治疗肠炎[4-5]以及抗肿瘤[6-7]。近几十年来，随着益生菌产品的健康功效被证明，益生菌产品受到广泛关注[8-9]，被广泛应用[10]到食品、保健食品和药品原料中[11-14]。然而，有调查发现一些商业益生菌产品的标识准确性存在问题，包括分类不准确、标识的菌种缺失、添加未申报的菌种等。益生菌产品因为菌株的差异，有益功效也不尽相同[15]，确认益生菌菌株及其活性是确保益生菌产品质量的关键。

双歧杆菌的鉴别主要以双歧杆菌的生物学特性为基础，利用分离培养技术[16-18]、形态鉴别或在培养基中添加显色成分，通过染色试验进行鉴别[19]，这些方法操作简单，但特异性差，受操作人员影响较大[20]。以分子生物学为基础的PCR检测方法，因其准确、快速、敏感、可靠及分辨率高的特点，在食品的鉴定中有较多应用[21-23]，食源性病原体[24]和鉴别污染来源也有应用PCR技术[25-26]，欧盟关于转基因生物检测的黄金标准检测方法也以PCR分析方法为基础[27]。PCR鉴别方法在益生菌和双歧杆菌的鉴别检测中也取得了长足的进展，并且发现实时荧光PCR方法对食品中双歧杆菌的检测也有较好的准确性和可靠性[28]。……