氯喹通过影响胰腺癌细胞自噬和线粒体功能对吉西他滨耐药细胞的作用及其机制

陆 路,黎东明,王学国,宋 丹,王太成,赵红岩,吴晓勇

（海南医学院第二附属医院肝胆胰外科，海南 海口570100）

胰腺癌（pancreatic cancer，PC）是临床上常见的恶性程度极高的消化系统肿瘤之一，但由于PC早期无明显临床症状，且临床缺乏有效药物等多种因素，导致其具有较高的致死率和较低的术后5年生存率［1-2］。吉西他滨（gemcitabine，GEM）是临床上PC患者化疗标准一线治疗药物，但近年来PC对GEM的耐药性不断增加，而临床联合使用其他药物能有效增加PC细胞对GEM的化疗敏感性，提高患者的总生存率［3］。研究［4］显示：GEM在治疗过程中会诱导肿瘤细胞产生自噬，而自噬作为一种广泛存在于细胞中的保护性机制，能够通过参与调控细胞的能量和物质代谢，从而促进肿瘤细胞的化疗抵抗。

氯喹（chloroquine，CQ）是一种经典的自噬抑制剂，其主要通过阻滞溶酶体与自噬体的结合从而发挥抑制自噬的作用［5］。近年来研究［6-9］显示：将CQ与传统化疗药物联合应用对恶性肿瘤的治疗效果较好。既往对PC的研究［9］显示：GEM联合CQ能明显改善肿瘤细胞对GEM的敏感性，但对于已发生GEM耐药的PC细胞，CQ是否还能发挥作用及其相关机制尚不明确。本研究建立GEM耐药PC细胞株，观察CQ对GEM耐药PC细胞株的作用和影响，并初步探讨其可能机制。

1 材料与方法

1.1 细胞和主要试剂人PC PANC1细胞系购自中国科学院上海细胞库。DMEM/HG和0.25%胰蛋白酶（美国Hyclone公司），CQ（美国Sigma公司），GEM（上海百灵威化学技术有限公司），胎牛血清（FBS）、青链霉素混合液（均为100 U·mL－1）（杭州四季青生物公司），BCA蛋白定量试剂盒（美国Pierce公司），CCK-8试剂盒……