犊牛腹泻大肠杆菌血清型鉴定

吴孟 覃杰

（新疆第二师畜牧兽医工作站 841005）

近年来，巴州地区犊牛腹泻的发病率和死亡率一直居高不下，大肠杆菌是引起犊牛腹泻的一个重要原因。犊牛腹泻造成犊牛生长发育迟缓或死亡，给养牛业带来较大的经济损失。因大肠杆菌血清型较多，变异较大，给大肠杆菌引起的腹泻防治带来困难，故本试验检测巴州地区致犊牛腹泻大肠杆菌的血清型，找到优势血清型，为犊牛腹泻的防治提供参考。

1 材料

1.1 病料

2019～2020 年间，采用灭菌棉签采集巴州地区6 家规模牛场、12 家散养户的共75 头腹泻犊牛深部直肠粪便拭子样品，同时采集病死犊牛的脏器样品，样品采集后24h 内做细菌的分离培养鉴定。

1.2 药品和主要试剂

普通琼脂培养基、普通肉汤培养基、麦康凯琼脂培养基、伊红亚甲蓝琼脂培养基，购自北京奥博星生物技术有限责任公司。细菌生化微量鉴定培养基，按常规方法配置。血清型检测试剂购自中国兽药监督所。

2 方法

2.1 细菌分离鉴定

棉签拭子接种于营养肉汤溶液，剪碎脏器样品接种于营养肉汤溶液，37℃过夜培养，形成增菌液，将增菌液用接种环在麦康凯平板连续划线，37℃培养18～24h 后观察培养特性，然后从每个平板挑取砖红色、圆形凸起的菌落，接种于伊红亚甲蓝琼脂平板，置37℃培养18～24h，观察分离细菌生长的菌落特点，同时用该菌落涂片，革兰染色、镜检，然后挑取典型菌落再接种于营养肉汤中进行纯菌增殖。生化试验按陆承平[1]介绍的方法对所有分离细菌进行生化指标测定。……