miR-322-5p通过NOX4调控细胞凋亡抑制大鼠神经管畸形发生

黄琬淇，刘玉思，顾卉，袁正伟

（中国医科大学附属盛京医院，国家卫生健康委员会小儿先天畸形重点实验室，沈阳 110004）

神经管畸形（neural tube defects，NTDs）作为最严重的出生缺陷之一，全球发病率约为1‰～10‰［1］。由于神经管的闭合失败，可出现如无脑儿、脊柱裂、脑脊髓膜膨出等一系列表型［2］。神经上皮细胞的过度凋亡导致神经管闭合异常，产生NTDs［3］。全反式维甲酸（all-trans retinoic acid，ATRA）可通过诱导细胞凋亡活动影响神经管闭合，引起NTDs的发生［4-5］，本研究组前期利用ATRA成功制作了NTDs胎鼠模型。

微RNA（microRNAs，miRNA）是一种长度为22～24 nt的内源性小型非编码 RNA 分子，通过与靶基因的3’端非翻译区（3’untranslated regions，3’-UTR）结合，诱导mRNA降解或抑制翻译，从而调控靶基因的转录和表达［6］。miR-322是细胞增殖、分化、凋亡等生物学活动的重要调控因子，对于心血管系统、神经系统及其他器官均有一定的保护作用［7-8］。研究发现，miR-322-5p可抑制高糖诱导的小鼠神经干细胞凋亡和NTDs的发生。本课题组前期研究［9-10］发现，胚胎体外注射miR-322-5p-mimic，对NTDs有治疗作用。但它与ATRA诱导的大鼠NTDs的关系仍有待研究。

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4，NOX4）是NADPH氧化酶家族的一个亚型成员，它的过表达可导致神经元的自身毒性以及大脑的局部缺血［11］。在高糖诱导的神经病变动物模型中，周围神经系统施旺细胞NOX4表达上调，促进细胞氧化应激参与周围神经损伤［12］。但NOX4在ATRA诱导的大鼠NTDs中的表达及作用尚未见报道。通过TargetScan及starBase生物信息学分析发现，NOX4是miR-322-5p的靶点，在NOX4mRNA的非翻译区存在miR-32-5p的潜在结合位点。本研究拟观察miR-322-5p与NOX4在ATRA诱导的大鼠NTDs模型中的表达及其对凋亡活动的影响，探讨NTDs的发生机制，以为其诊疗提供新靶点。……