PRUNE2点突变影响前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移

曹达龙，朱文恺，施国海，张海梁，王子良，叶定伟

复旦大学附属肿瘤医院泌尿外科，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海 200032

前列腺癌是泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤。2021年统计数据显示，前列腺癌位居欧美男性新发恶性肿瘤之首，同时亦是男性恶性肿瘤相关死亡的第二大原因［1］。在中国，前列腺癌的发病率近年来呈快速增长态势［2］。前期研究［3-4］显示，前列腺癌抗原3（prostate cancer antigen 3，PCA3）显著高表达于前列腺癌中并能促进前列腺癌细胞的增殖；鉴于PCA3嵌在PRUNE2基因内含子6中以及它们的转录方向正好相反，我们进一步研究发现，PRUNE2基因受PCA3的负向调控。既往研究［5］证实，PRUNE2还是成神经细胞瘤的一个特异性预后相关基因，在调节成神经细胞瘤的细胞分化、增殖和侵袭方面发挥着重要作用。前期研究［4］还发现，在激素抵抗型前列腺癌患者癌组织中检测到PRUNE2 E370K突变，突变后其表达的蛋白在该位点的氨基酸残基由谷氨酸（E）变成了赖氨酸（K），这可能引起该区域空间结构和功能的剧烈变化，进而调控其下游的信号转导通路变化。本研究拟探索此位点突变对前列腺癌细胞生物学行为的影响，以期发现前列腺癌诊治及预后评估的新靶点。

1 材料和方法

1.1 细胞系和细胞培养

人前列腺癌DU145细胞系购自美国典型培养物保藏中心（American Type Culture Collection，ATCC）细胞库。培养基为含有10%胎牛血清的RPMI-1640培养基，将DU145细胞置于培养基中于37 ℃、CO2体积分数为5%的培养箱中进行培养。

1.2 主要试剂

细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8，CCK-8）购自日本同仁化学研究所，transwell小室购自……