高效液相色谱法在小麦激素测定中的优化

唐晓东，蒋春志，徐俊杰，张丽，樊翠芹，于翠红

（河北省农林科学院粮油作物研究所/河北省作物遗传育种实验室，河北 石家庄 050035）

植物激素是植物体内产生的一些微量但能调节自身生理过程的有机化合物，与植物生长发育密切相关，是研究植物代谢生理的重要内容[1～3]。准确测定植物激素种类和含量，对于植物的栽培生理、发育生理[4，5]以及抗性生理[6]研究具有重要作用。

虽然目前激素检测手段已经发展到质谱水平，但受限于仪器价格高昂，因此质谱技术在小麦激素检测方面的应用还很少[7～9]，液相色谱仍是植物激素检测的主要仪器。但是，已有的高效液相色谱检测植物激素方法一般只能检测2～4 种[10～16]，检测时间在25 min以上[11～13，17，18]，检测能力和效率还有很大的提升空间。基于对以上几方面的改进，采用高效液相色谱法对小麦激素测定进行优化，将植物激素检测种类提升至7 种，检测时间缩短到15 min，从而显著提高了液相色谱法在小麦植物激素的检测能力和检测效率。

1 材料与方法

1.1 试验材料

参试小麦品种为冀麦325。将Hoagland 营养液水培的小麦苗，取相同部位的叶片和根，3 次重复，称量后与钢珠一起置于2 mL 离心管中，于液氮中冷冻后在-80 ℃超低温冰箱保存，备用。

试验仪器有Agilent 1200 型高效液相色谱仪、ZORBAX Eclipse XDB-C18 色谱柱 （4.6 mm×150 mm）、eppendorf 5810R 型离心机、QIAGEN Tissue lyserⅡ组织破碎仪和减压蒸干装置（自研）。

试剂中，tZ（反式玉米素）、tZR（反式玉米素核苷）、α-萘乙酸（NAA）、吲哚-3-乙酸（IAA）、赤霉素A3（GA3）、6-苄氨基嘌呤（6-BA）和脱落酸（ABA）标准品均为索莱宝公司生产；甲醇（色谱纯）等色谱试剂为Fisher 公司生产；……