一种猪肺炎支原体阳性血清的制备方法

黄玉婷 兆丰华生物科技（福州）有限公司 福州 350014

猪支原体肺炎 （Mycoplasmal pneumonia of swine，MPS）是由猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae，Mhp）引起的猪的一种接触性呼吸系统传染病，在我国也称为猪喘气病。该病发病率高、病死率低，但由于其流行的广泛性、长期性、消耗性，常常降低猪只的平均日增重和饲料转化率，给养猪业带来巨大的经济损失[1]。

目前，疫苗免疫接种是预防和净化猪支原体肺炎最经济有效的手段[2]。根据《兽药质量标准》2017年版生物制品卷规定，猪支原体肺炎活疫苗必须进行鉴别检验，该项检验需用抗Mhp特异性血清（AGP效价≥1:8）对样品进行中和。本研究以兔作为试验动物，建立猪肺炎支原体阳性血清制备方法，不但成本相较于猪低，同时降低了同源动物其它外源病毒的污染风险，为猪肺炎支原体研究、诊断、鉴别等提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 体重1.5～3.0 kg新西兰兔，购自上海市松联试验动物场。

1.1.2 猪肺炎支原体（168株）抗原 由兆丰华生物科技（福州）有限公司生产，效价为109CCU/mL。

1.1.3 猪支原体肺炎活疫苗（168株） 由兆丰华生物科技 （福州）有限公司生产，效价为108CCU/头份。

1.1.4 猪鼻支原体（CVCC361） 购自中国兽医微生物菌种保藏管理中心。

1.2 方法

1.2.1 灭活疫苗制备 将猪肺炎支原体（168株）抗原用灭活剂进行灭活后乳化，制备猪支原体肺炎灭活疫苗，分装备用。

1.2.2 动物筛选 挑选体重1.5～3.0 kg大兔，按照表1中列出的检测方法和判定标准，对猪肺炎支原体、猪鼻支原体、猪滑液支原体、猪瘟病毒、非洲猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒等相关抗原抗体进行检测。……