HPLC同步检测四味穿心莲散中绿原酸和芦丁的含量

姜煜倩， 姚 丹， 王宏军*， 谭 婷， 李佳佳，单文琪， 张 达， 蒋 红， 胡昭伟

（1.锦州医科大学畜牧兽医学院，辽宁锦州121001；2.锦州市北山农垦有限责任公司，辽宁锦州121000）

四味穿心莲散由穿心莲、辣蓼、大青叶、葫芦茶四味中草药组成，具有清热解毒、除湿化滞的功能，主治鸡泻痢、积滞。陶松若等（2020）研究表明，四味穿心莲散水煎液体外对沙门氏菌有抗菌活性；陈建蓉等（2009）、王林等（2017）、班燕桃等（2020）均用薄层色谱法（TLC）对四味穿心莲散中大青叶相关成分进行了检测分析；王艳秋等（2013）、包爱情（2016）用高效液相色谱法（HPLC）对四味穿心莲散中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯进行了检测，鲜见对该组方中其他成分的HPLC检测。鉴于此，本实验以甲醇为提取溶剂，旨在建立HPLC同步测定四味穿心莲散中绿原酸与芦丁的方法。

1 材料与方法

1.1 主要仪器 高效液相色谱仪：L-7420（日本日立公司），配四联泵、脱气泵、紫外检测器和柱温箱；色谱柱：岛津InertSustian C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）（天津市尚亚科技发展有限公司）；旋转蒸发仪：RE-5203型（上海亚荣生化仪器厂）；超声波清洗器：KQ-300B（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 主要试剂 甲醇（分析纯，天津市风船化学试剂科技有限公司）；乙腈（色谱纯，天津市津东天正精细化学试剂厂）；磷酸（分析纯，天津南开大学精细化工股份有限公司）；穿心莲、辣蓼、大青叶、葫芦茶购自辽西国药店；绿原酸、芦丁对照品购自成都曼思特生物科技有限公司。

1.3 色谱条件 流动相：乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱，有机相洗脱梯度为0～20 min，12%～18%乙腈；20～30 min，18%～19%乙腈；30～36 min，19%～20%乙腈；36～43 min，20%～25%乙腈；43～48 min，25%～12%乙腈。流速：1.0 mL/min；柱温：25℃；检测波长：355 nm；进样量：10 μL。……