eNOS/PKG-1通路在L-精氨酸抗野百合碱所致大鼠右心室重构中的作用

任星桥，李晓彤，林小英，曾凡群，李叶丽，杨丹莉

(遵义医科大学药学院，基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室，贵州 遵义 563099)

右心室重构导致的心力衰竭是肺动脉高压患者死亡的主要原因之一[1]。目前认为右心室重构主要涉及心肌细胞肥大、凋亡、炎症、氧化应激及一氧化氮(nitric oxide，NO)缺乏等方面[2]。其中，内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)催化L-精氨酸(L-Arginine，L-arg)生成NO，一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)抑制剂NG-硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)可阻断上述反应。L-NAME是NOS的抑制剂，能够降低细胞内NO含量，诱导大鼠左心室肥厚[3]。eNOS的表达降低可引起NO生成减少，下游蛋白激酶G1(protein kinase G1，PKG-1)表达降低，使细胞内游离Ca2+浓度升高，导致血管收缩，心肌细胞肥大，促进心室重构的发生。PKG又称环磷酸鸟苷依赖型蛋白激酶，有PKG-1和PKG-2两种类型[4]，其中PKG-1主要分布于血管平滑肌细胞、心肌细胞的细胞质中，PKG-1可使肌球蛋白轻链去磷酸化，细胞内游离Ca2+浓度降低，产生舒张血管、抑制心肌细胞肥大等作用。野百合碱(monocrotaline，MCT)所致大鼠右心室重构模型，是目前常用于研究右心室重构的病理模型[5]。目前PKG-1在L-arg改善MCT所致右心室重构中的作用鲜有报道。本研究旨在借助工具药L-NAME，探讨eNOS/PKG-1通路在L-arg干预MCT所致大鼠右心室重构的作用。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂

1.1.1药品 MCT(产品编号：C2401-1G，Sigma公司)；L-精氨酸(产品编号：HY-N0455，MCT公司)；L-NAME(产品编号：HY-18729A，MCT公司)。

1.1.2试剂 cTnI兔单克隆抗体(产品编号：ab209809，abcam公司)；eNOS小鼠单克隆抗体(产品编号：ab76198，abcam公司)；PKG-1兔单克隆抗体(产品编号：#3248，Cell Signaling公司)；GAPDH兔多克隆抗体(产品编号：10494-1-AP，Proteintech公司)；β-actin兔多克隆抗体(产品编号：AF7018，Affinity公司)；……