藁本黄酮的纯化及体外抗氧化活性研究

韩秋菊，李薇，冯雅郡，王晨，陈仔君，潘睿悦，任璐，罗静雯

(辽宁石油化工大学 石油化工学院，辽宁 抚顺 113001)

藁本为伞形科植物藁本LigusticumsinenseOliv.或辽藁本LigusticumjeholenseNakaietKitag.的干燥根茎和根[1]，具有去湿除寒、缓解疼痛、抑菌抗炎、抗氧化、扩张血管、保护肝功能等功效，常用于医治风湿感冒、关节疼痛等疾病，是一种重要的中药材[2-4]。

大孔树脂具有污染低、稳定性高、选择性强、易操作等优点，常用于黄酮类化合物的分离纯化[5]。本文通过D-101大孔树脂柱层析对藁本黄酮粗提物进行纯化，并比较了纯化前后藁本黄酮的体外抗氧化活性，为更好地开发藁本资源、最大限度地利用其有效成分提供科学的理论依据。

1 实验部分

1.1 材料与仪器

藁本，产自辽宁抚顺；芦丁标准品、DPPH均为色谱纯；硝酸铝、氢氧化钠、亚硝酸钠、过氧化氢、水杨酸、盐酸、硫酸亚铁、三羟甲基氨基甲烷、无水乙醇、邻苯三酚、抗坏血酸均为分析纯。

ALC-1100.2型电子天平；Allbasic型分析研磨机；UV-2600型紫外可见分光光度计；HH-4型数显恒温水浴锅；DUG-9021A型电热恒温干燥箱；T0Z5-WS型离心机；LGJ-10型冷冻干燥机；RE-52AA型旋转蒸发器；SHB-Ш型循环水式多用真空泵。

1.2 实验方法

1.2.1 藁本黄酮的提取 取烘干的藁本样品，粉碎后过60目筛，以液料比15∶1加入75%的乙醇浸泡，超声(200 W，40 ℃，15 min)，水浴(50 ℃，2 h)，离心(3 000 r/min，5 min)，取上清液，55 ℃浓缩，冷冻干燥，得藁本黄酮粗提物。准确称取藁本黄酮粗提物，溶于70%乙醇中制备藁本黄酮粗提液。

1.2.2 藁本黄酮含量的测定 黄酮含量按照NaNO2-Al(NO3)3-NaOH比色法测定[6]。芦丁标准曲线的线性回归方程为y=0.290 2x-0.005 1，

R2=0.999 8。

1.2.3 藁本黄酮的纯化

1.2.3.1 D-101大孔树脂的预处理 将D-101大孔树脂放入烧杯中，用95%乙醇浸泡12 h，充分溶胀后，滤除悬浮物，用95%乙醇反复冲洗，至加水不产生浑浊为止，用蒸馏水冲洗至无醇味，备用。……