猪德尔塔冠状病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及初步应用

钱炳旭，白雪雁，张成成，郭梦娇，李梦娇，廖 凯，薛 峰，吴艳涛，张小荣*

(1.扬州大学 兽医学院 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏 扬州 225000；2.南京农业大学 动物健康与食品安全国际合作实验室，江苏 南京 210095)

猪德尔塔冠状病毒(porcine Deltacoronavirus，PDCoV)是2012年首次在中国香港发现的肠道致病性冠状病毒[1]，可感染各个年龄段的猪，对新生仔猪有较强的致病性，表现为水样腹泻、呕吐，严重时会因脱水致死，发病率和病死率较高[2-5]。2014年，美国首次出现PDCoV的大规模流行，俄亥俄州、爱荷华州、伊利诺斯州等多地相继暴发了仔猪腹泻，研究人员在发生腹泻的猪场检测到PDCoV，并采集病料进行了病毒分离[6-7]。随后，PDCoV在泰国[8]、加拿大[9]、韩国[10]、中国[11]等地均有出现和报道，呈现全球流行的趋势，逐渐成为威胁世界养猪业的重要腹泻病原之一。

PDCoV属于冠状病毒科、德尔塔(δ)冠状病毒属，是有囊膜的单股正链RNA病毒，病毒粒子呈多形性，内部基因组RNA和核衣壳蛋白组成了核蛋白核芯。病毒外膜上有大量棒状结构突起，直径为60～180 nm，呈典型的“皇冠”状冠状病毒形态[12]。PDCoV的基因组约为25.4 kb，是目前已知的冠状病毒中基因组最小的，GC含量约为43%。基因组组成、排列顺序为：5′非翻译区(untranslated region，UTR)、开放阅读框(open reading frame，ORF)1a/1b、棘突蛋白(spike，S)、小膜蛋白(envelope，E)、膜蛋白(membrane，M)、核衣壳蛋白(nucleocapsid，N)、辅助蛋白NS6、辅助蛋白NS7以及3′端非翻译区[13]。

PDCoV感染后的病理变化与猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus，TGEV)十分相似，主要表现为肠壁变薄、透明(远端空肠至结肠)，肠腔内有大量淡黄色的液体；……