武月园,邵颖利,张可源,周金莲,汤晓丽
(鲁东大学农学院,山东烟台 264025)
猕猴桃是雌雄异株植物,利用猕猴桃种子苗嫁接生产雌株苗周期长[1],且实生苗的性状不稳定,准确辨别幼株的性别较难,且实生苗嫁接雌株后差异较大。经组织培养得到的雌株性状稳定,生长整齐,结果一致,繁殖速度快,是目前迅速繁育良种的方式[2-5]。
红阳猕猴桃是由四川省自然资源研究所选育的中华猕猴桃优良红肉型品种,果肉黄绿色,果心呈红色放射状,肉质细滑,每100 g鲜果维生素C含量135 mg,总糖含量13.45%,超出海沃德近5%[6],深受消费者的喜爱[7]。笔者以红阳猕猴桃为试材进行组培繁育,研究不停种类、不同浓度的植物生长调节物质对其增殖和生根的影响,以筛选各阶段最适的培养条件,为建立红阳猕猴桃组培快速繁育技术体系提供技术支持。
试验材料为鲁东大学农学院农林遗传改良中心实验基地栽植的红阳猕猴桃,剪取2年生植株的新梢幼嫩茎段做组培材料,于4 ℃低温保存24 h。
组培苗增殖用MS为基本培养基,生根用1/2 MS为基本培养基。培养基蔗糖浓度30 g/L,琼脂浓度7 g/L,pH值5.80~5.85。组培室培养条件:采用日光灯管模拟光照,培养温度 (25±2) ℃,空气相对湿度50%~60%,光周期为12 h光照、12 h黑暗。
初代无菌苗的培养。将4 ℃低温保存的幼嫩新梢剪成3.0~5.0 cm的带芽茎段,先用流水冲洗2 h;将茎段转移到无菌超净工作台上,无菌水浸泡茎段,摇晃1 min左右,倒掉水;然后用75%乙醇浸泡30 s;无菌水冲洗3~4遍;0.1%的氯化汞消毒10 min;无菌水冲洗5~6次,最后用无菌滤纸吸干茎段表面水分。……