miR-27a-3p 在氧糖缺失-复氧复糖损伤PC12 细胞中的表达及其对PC12细胞增殖、凋亡的影响

李俊杰，彭丽佳，罗靖，熊莉，邵建林

昆明医科大学第一附属医院麻醉科，昆明650000

缺血性脑卒中是目前常见和多发的神经系统疾病之一，有较高的致残、致死率［1］。脑缺血发生后最有效的治疗是通过溶栓或取栓，尽快恢复阻塞部位血管的再通，然而，脑血管再通、血流再灌注会引起某些部位缺血性脑组织的损伤或神经功能的进一步恶化，即发生脑缺血-再灌注损伤（CI-RI）［2］。CI-RI的机制较复杂，主要包括氧化应激、兴奋性毒性、细胞内钙离子超载等，而细胞凋亡被认为是再灌注损伤早期引起缺血区域神经细胞死亡的主要原因之一［3］。miRNAs是一种短链非编码的小RNA，在各器官、组织和细胞中均有表达，存在于中枢神经系统中。在CI-RI 过程中，miRNAs是神经元存活的重要调节因子［4-5］。近年研究表明，miR-27a-3p在黑色素瘤［6］、卵巢癌［7］、骨关节炎［8］等疾病中有调节细胞增殖和凋亡作用。然而，有关miR-27a-3p在CI-RI中的相关研究鲜见报道。本研究拟应用氧糖缺失-复氧复糖（OGD/R）损伤的PC12细胞模型，体外模拟CI-RI病理状态，观察miR-27a-3p在OGD/R损伤的PC12细胞中表达，探讨miR-27a-3p对OGD/R损伤PC12细胞增殖和凋亡的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 PC12 细胞细胞株购自中国科学院昆明动物研究所；DMEM高糖培养基购自美国HyClone公司；miR-27a-3p模拟物序列、miR-27a-3p模拟物阴性对照序列、miR-27a-3p 抑制剂序列和miR-27a-3p 抑制剂阴性对照序列由广州复能基因有限公司合成；Ploybrene 慢病毒购自上海吉凯基因科技有限公司；CCK-8试剂盒购自日本同仁化学研究所；MicroRNAs逆转录试剂盒和mRNA 逆转录试剂盒购自美国Genecopoeia公司；miR-27a-3p、Caspase-3、Bax、Bcl-2、U6 和β-actin 引物均由北京擎科生物科技有限公司合成；……