依维莫司干预肾癌细胞时解偶联蛋白2对能量代谢的影响及意义

罗浩鸣，谷江，张永春，沈亚楠

贵州医科大学附属医院泌尿外科，贵阳550004

依维莫司作为哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）抑制剂之一，目前广泛应用于晚期肾癌治疗，主要机制包括干扰细胞周期、血管新生、糖酵解等相关蛋白的翻译和合成［1］。然而，依维莫司在临床上的治疗效果并不让人满意，P13K-Akt-mTOR 通路的再次激活可能是导致治疗失败的关键因素。P13K-Akt-mTOR 是癌症发生和发展的主要信号通路，通过调控能量代谢相关蛋白表达及糖酵解关键酶类活性，满足肿瘤细胞恶性增殖的需要［2］。UCP-2作为线粒体内膜上的转运蛋白，具有介导质子漏、调节细胞内氧化水平、影响线粒体膜电位等功能［3］。BAFFY 等［4］发 现 ，UCP-2 高 表 达 使 三 磷 酸 腺 苷（ATP）的主要来源从细胞内线粒体氧化磷酸化转变为胞质有氧糖酵解。最新研究显示，mTOR 抑制剂通过与线粒体直接相互作用改变线粒体载体蛋白的基因表达从而影响线粒体功能，并且该研究还发现mTOR 抑制剂的使用增加了UCP-2 表达，使P13KAkt-mTOR 通路再次磷酸化，诱导肿瘤自噬和产生抵抗。UCP-2 可能是依维莫司治疗效果差的关键。2020 年4 月—10 月，本研究观察了依维莫司靶向抑制肾癌细胞时UCP2 的表达变化对癌细胞增殖及凋亡的影响，从线粒体产能结构角度分析UCP2 表达上调后对细胞能量代谢的调控及糖酵解关键酶活性的影响，为肾癌靶向治疗提供思路。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂及仪器 肾癌细胞（GRC-1）购自上海弗雷堡生物公司，依维莫司购自北极博奥森公司（4 ℃避光保存），DMEM/F-12 和MTT 试剂盒购……