包淋斌,龚剑明,姚利平
(1.广昌县畜牧兽医局,江西抚州 344900;2.濂溪区农业农村局)
牛口蹄疫是由口蹄疫病毒属引起的一种烈性的传染病,主要特征为口、蹄部出现水疱,该病发病快、传染性强、死亡率高,对肉牛养殖危害非常大,严重影响肉牛养殖场户的生产效益[1~3]。口蹄疫病毒为无囊膜的RNA病毒,变异频率很高,致使流行毒和疫苗毒种间存在抗原差异,当差异到一定程度,会降低疫苗的免疫效果[4~5]。牛口蹄疫ELISA试验法是口蹄疫免疫抗体检测中最为常用、最广泛、最便捷的一种,具有简便、快速、灵敏、载体易于标准化等特点,是当前基层动物疫病预防控制中心实验室检测口蹄疫最常用的方法。该方法是利用抗原和抗体相结原理,将抗体吸附在固相载体表面,通过酶标仪吸光强弱,来鉴定的血清中O型口蹄疫抗体水平,判断肉牛群体的免疫效果[6~7]。本文旨在通过竞争ELISA法对牛O型口蹄疫抗体进行试验监测,为掌握广昌县范围内肉牛养殖场O型口蹄疫免疫效果情况,为科学防控O型口蹄疫提供参考依据。
1.1.1 试剂盒。口疫病抗体检测试剂盒由深圳真瑞生物科技有限公司提供(含对照组:阴性对照组为没有抗体试验用试剂液,阳性对照为有抗体试验用试剂液)。
1.1.2 血清。用采血管采集全县6个已注射O型口蹄疫疫苗的肉牛养殖场牛血样共60份,用2 000r/min离心5min,倒出上清血清,装于1.5mLPE试管中,放于冰箱冷冻,保存备用,血清清亮,无溶血。
1.1.3 洗涤液的准备。浓缩洗涤液使用前应恢复至室温,如有盐结晶,摇动使结晶的岩溶解,然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。……