OC-116 基因表达载体构建及其对鸡子宫上皮细胞Ca2+浓度和脂质指标的影响

廖朝美，吴 磊，游敏芳，谭光辉，李杰章，张依裕*

（1.贵州大学动物科学学院，高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室，贵州贵阳 550025；2.安顺市立华牧业有限公司，贵州安顺 561000）

蛋壳基质蛋白卵白蛋白-116（Ovocleidin-116，OC-116）是一种硫酸软骨素蛋白多糖，在蛋壳的栅栏层、乳头层、角质层都有分布，是禽蛋壳中特异性的基质蛋白，主要参与蛋壳形成[1]。OC-116作为禽蛋壳中含量较多的有机基质组分，能在子宫细胞中表达，但其表达具有时间特异性，只有在蛋壳钙化时才能检测到OC-116的mRNA[2]。蛋壳由95%的方解石碳酸钙矿物和3.5%的有机基质蛋白质组成[3]。从无定形碳酸钙颗粒到方解石晶体的转变，称之为蛋壳钙化，是由子宫中的基质蛋白促进的[4-5]。Chen 等[6]研究发现，当子宫中OC-116表达减少，蛋壳的形成过程会受到抑制，钙的供应和运输、外膜的形成和方解石晶体的钙化也会受到影响。可见，OC-116能通过调控蛋壳的钙化来调控鸡子宫上皮细胞的Ca2+浓度。而Ca2+信号传导和脂质结构域之间有相互作用，Ca2+能改变脂质代谢[7]。王丽等[8]研究发现，钙有抗肥胖的作用，与添加1.4 %钙浓度日粮相比，饲喂钙浓度为2.8%的日粮后，小鼠体重和血脂会有显著下降，因为补充钙能提高小鼠血清和组织中的钙含量，从而促使脂肪酶的活性降低。目前，钙与脂之间的调控关系研究较为广泛，但关于OC-116基因过表达量影响鸡子宫中Ca2+含量与脂质的研究鲜有报道。本研究通过构建pcDNA3.1（+）+OC-116+Flag 表达载体，转染鸡子宫上皮细胞，测其基因表达量、Ca2+浓度和脂质指标，然后进行三者的相关性分析，为深入阐释鸡子宫上皮细胞中钙和脂质的分泌路径提供理论基础。……