大鼠肾虚型椎间盘软骨终板退变病证结合模型的构建与评价

夏炳江，沈兴潮，胡松峰，韦金忠，许杨

(绍兴市中医院，浙江 绍兴 312000)

软骨终板(cartilage endplate，CEP)退变被认为是椎间盘退变(intervertebral disc degeneration，IDD)的始动因素[1-2]，研究CEP退变可为早期防治IDD提供新的理论依据。中医学认为“肾虚”为腰痛的关键病机[3]，补肾中药治疗与IDD相关的疾病具有独特优势[4]，但要进一步探讨其作用机制或对其有效性和安全性进行验证，尚需进行大量的动物实验。病证结合动物模型以疾病模型为基础，具有较好的可靠性和稳定性，同时引入“证候”概念，能很好体现中医“证候”的阶段性及动态性变化，是研究中医临床疾病的良好平台和载体[5]。目前，在CEP退变的研究领域尚缺乏适宜于中医药研究的病证结合动物模型。本文拟通过切除大鼠双侧卵巢并结合阻断CEP营养供应法而构建肾虚型CEP退变病证结合动物模型，以进一步研究病与证之间的内在规律。

1 材料与仪器

1.1 实验动物12周龄SPF级雌性SD大鼠108只，体质量(200±20)g，由浙江中医药大学动物实验中心提供，实验动物许可证号：SYXK(浙)2008-0115。所有大鼠普通颗粒饲料喂养，自然光照，自由进食进水。实验方案通过医院医学伦理委员会审查通过。

1.2 实验仪器与试剂组织脱水机(日本樱花公司)，轮转式切片机(德国Leica公司)，荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain recation，PCR)仪(美国ABI公司)，普通PCR仪(德国Eppendorf公司)，多光谱小动物活体成像仪(美国Carestream Health公司)，Micro-CT(瑞士Scanco Medical AG公司)，反转录试剂盒(大连TaKaRa公司)，定量试剂盒(大连TaKaRa公司)，PCR引物[生工生物工程(上海)股份有限公司]。

2 方 法

2.1 动物分组与造模将108只大鼠，按随机区组设计原则，随机分为空白组、CEP退变模型组和病证结合模型组，每组36只。……