杨红媛,张厚德,朱煜景,迟昕宜,牛锐利,谭冰,宗宪春
(牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江 牡丹江 157011)
紫苏(PerillafrutesceusL.Britt)为唇形科(Labiatae)一年生草本植物,具特异芳香,是我国传统的药食、油料作物,也是卫生部第一批规定的既是药品又是食品的60种作物之一,是一种极具开发利用的天然产物。目前有关紫苏组织培养及快繁技术虽然取得了一些进展,但如何建立起一套完善的高频的紫苏离体快繁体系研究的还不够深入。本研究以紫苏为材料,通过对其子叶、下胚轴、幼嫩叶片最佳外植体的筛选、愈伤组织诱导、不定芽分化及生根培养,建立紫苏的离体培养再生体系,为紫苏种质资源保存及快速繁殖提供理论依据和技术支撑。
本文使用的紫苏种子购买于牡丹江花鸟鱼市场,产于哈尔滨金龙农业有限公司。所使用的激素:6-BA(6-benzylaminopurine,6-苄基嘌呤)、NAA(1-naphthyla-cetic acid,萘乙酸),IAA(Indolyl-3-acetic acid,吲哚乙酸)均为北京拜尔迪生物技术有限公司产品。
1.2.1 不同消毒时间处理对紫苏种子萌发的影响。将紫苏种子在清水中浸泡6 h,然后放入0.1%的升汞中分别消毒4、6、8、10、12 min;然后将种子取出,用无菌水冲洗5次,再将种子播种在装有事先配制好的MS培养基的培养瓶中。整个过程均在无菌超净工作台进行。培养15 d后观察并统计种子的污染率和发芽率。筛选消毒的最佳时间。
1.2.2 培养基种类不同对紫苏种子萌发的影响。用0.1%的升汞对紫苏种子消毒8 min,无菌水冲洗5次后将种子分别播种到盛有MS和1/2MS培养基中进行培养,15 d后观察并计算种子的发芽率。……