基于诱导突变牡蛎共生真菌的代谢产物*

梁梦迪 尹楠楠 李藤藤 王 月 张 震 王焕南

(济宁医学院药学院，日照 276826)

海洋微生物作为生物活性代谢物最丰富的来源之一，是先导化合物的重要源泉[1-3]。海洋真菌产生的次级代谢产物分子质量相对较小，但活性优良，多数化合物具有抗肿瘤、抗病毒、抗AD、免疫抑制和酶抑制等作用[4-6]。微生物变异是生物进化的基础推动力[7]，然而在人工培养的单一稳定环境下，微生物大部分基因簇通常处于沉默状态[8]，很多基因未能完全表达，而自然选育耗时长，工作量大且效率低。人工诱变育种可采用加入诱变剂、紫外照射、微波等加速微生物突变，从而在相对较短的时间内获得有实用价值的突变体，改善菌株特性[9-11]。本研究基于前期从牡蛎中分离得到的真菌Alternariaalternata，通过化学、物理以及复合诱导调控等方法，以期激活真菌的沉默基因簇，充分发掘微生物次级代谢的潜力，为获得大量新型结构活性天然产物提供信息支持。

1 材料和试剂

1.1 主要试剂和仪器

葡萄糖、麦芽糖、乙酸乙酯(国药集团化学试剂有限公司)；UN1Q-10柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒(上海生工公司)；琼脂粉(青岛海博生物公司)；乙酰胆碱酯酶(苍蝇头部)、碘代硫代乙酰胆碱、DTNB、胰蛋白胨、DPPH、磷酸二氢钠、硫酸二乙酯(DES)、抗坏血酸等购自上海源叶生物科技有限公司。

恒温振荡培养箱(天津市莱玻特瑞公司)；恒温恒湿培养箱(上海精宏公司)；电泳仪(北京六一公司)；离心机(赛默飞公司)；超净工作台(苏州安泰公司)；立式蒸汽灭菌器(上海博讯公司)；……