深圳市罗湖区女性HPV感染分布特点及类型特征分析

何文凤，王莉辉，曾红燕，王秀香，姜艳华

(深圳市罗湖区妇幼保健院 1.妇科；2.妇保科；3.妇幼信息科，广东 深圳518019)

人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)是男性和女性最常见的性传播病原体。越来越多的流行病学证据支持HPV与生殖器疣以及宫颈癌、外阴癌、阴道癌、肛门癌和阴茎癌之间的紧密联系[1-2]。全球妇女中将近90%的宫颈癌死亡病例在发展中国家[3]。在中国每年有13万例宫颈癌新发病例，约占全球总数的28%[4]。尽管全球约70%的子宫颈癌中HPV16和18型起主要作用[5]，但是还有许多其他类型的HPV分布[6-8]，世界范围最常见的HPV类型如下：南美，16、58、18、45、31；北美，16、53、18、51、31；东欧16、31、18、66、39；南欧，16、66、45、31、42和西欧，16、18、31、35、33。即使在本国内部，各类型分布也有很大差异。如四川省最常见的五个是52、53、58、16和56[9]；广东省最常见的五个是16、52、58、18和45[10]。这些表明需要更好地了解病毒感染的流行病学，对高危HPV类型分布的详细了解有助于为疫苗分配提供依据，低危HPV类型分布可能对后续外阴阴道疾病的深入研究有帮助。本文介绍了深圳罗湖区妇幼保健院2018年4月-2020年12月妇女HPV筛查的结果，旨在对所属辖区人群HPV 感染状况有较为全面的了解。

1 资料与方法

1.1 一般情况深圳市罗湖区妇幼保健院从2017年4月到2019年12月对本辖区35993女性进行HPV检测和分型，其中4544例HPV阳性。

1.2 样本采集和检测依据标准程序，宫颈刷置于宫颈外口处轻刷并顺时针旋转数圈，取出宫颈刷放入专有保存液中，4-20℃保存，2周内完成检测。HPV分型检测试剂由凯普生物化学有限公司生产，依次进行DNA分离提取、PCR 扩增、PCR产物杂交、显色和结果判定等实验。

1.3 概念及统计学处理患者同时感染2种及以上HPV基因型情况，定义为多重感染现象。在纳入研究的所有4544个样本中，最初确定了HPV的总体患病率，然后进行分析，以确定HPV阳性样本中的类型特异性分布。这些结果也在不同年龄组的背景下进行了分析。采用SPSS19软件系统(IBM，Armonk，NY)，计数资料以百分率表示，采用χ2检验。所有的统计检验都是双侧的，P<0.05被认为具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同阶段HPV感染状况

本辖区2017年4月1日至2019年12月31日共计筛查35993名女性，检出4544例HPV阳性病例，总感染率12.62%(4544/35993)。将受检者按照登记时间分为2018年、2019年和2020年共3个组。各组HPV阳性率分别为12.27%、12.59%和12.86%，各组相比较，差异没有统计学意义(χ2=1.885，P=0.390)。(2)依时间次序各组HPV多重感染率分别为14.17%(168/1186)、14.55%(186/1278)和20.05%(417/2080)，多重感染率随时间在增加，2020组与2019年、2018年比较差异有统计学意义，(χ2=25.905，P<0.01)，见表1。

表1 不同阶段本地区筛查HPV感染状况

2.2 HPV检出情况调查期间本地区女性单一感染3773例，占总感染例数的83.03%(3773/4544)；多重感染例数共771例，占总例数16.97%(771/4544)。HPV各亚型检出总频度为5543次，其中高危型占86.4%(4788/5543)，低危型占13.6%(755/5543)。高危型感染总体频度为13.3%(4788/35993)。

(1)有检出22种基因型，其中15种高危型检出例数及阳性率从高到低依次为：52型(1057，23.26%)、16型(533，11.73%)、58型(490，10.78%)、39型(446，9.82%)、53型(374，8.23%)、51型(318，7%)、18型(293，6.45%)、68型(274，6.03%)、33型(195，4.29%)、56型(188，4.14%)、66型(186，4.09%)、31型(164，3.61%)、59型(105，2.31%)、35型(91，2.0%)、45型(74，1.63%)；其中低危型7种检出例数及阳性率从高到低依次为：CP8304型(276，6.07%)、44型(158，3.48%)、42型(112，2.46%)、6型(89，1.96%)、11型(62，1.36%)、43型(57，1.25%)和83型(1，0.02%)，见表2。HPV感染以高危型为主，见图1。

(2)多重感染以二重感染和三重感染为主，共726例，占多重感染例数的94.16%(726/771)；而四重及以上的多重感染仅有45例，占多重感染例数的5.83%(45/771)。HPV病毒多重感染分布结果见表3。

2.3 不同年龄组HPV感染状况

将35993例受检者按照年龄大小分为≤25岁、26-30岁、31-40岁、41-50岁、51-60岁和> 60岁共6个年龄组。(1)各年龄组HPV阳性分布特点见表4。≤25岁组和> 60岁组均明显高于其他各组。(2)单一感染以≤ 25岁年龄组和41-50岁年龄组最高，分别为88.46%和84.23%，多重感染以>60岁年龄组和26-30岁年龄组最高，分别为29.68%和19.47%。

表2 深圳罗湖区HPV各亚型感染类型分布

表3 深圳罗湖区女性HPV病毒多重感染分布

表4 不同年龄组HPV感染状况

(3)单一感染以HPV高危亚型为主，各年龄组高危亚型占单一感染比率为20.05%-98.2%。多重感染病例以高危-高危复合型(HR-HR)(最多的是52/39型)和高危-低危复合型(HR-LR)为主，不同年龄组中二者占多重感染比率为96.59%-100%。仅检测出8例低危-低危复合型(LR-LR)，见表5。

图1 HPV类型按感染例数从高到低的特异性分布

表5 不同年龄组HPV阳性患者单一感染和多重感染情况

3 讨论

宫颈癌是中国15-45岁女性中第二常见的癌症[4]。目前，已有超过100种不同类型的人乳头瘤病毒被描述，根据其致癌潜能，可进一步细分为低风险型和高风险型。据国际癌症研究机构(IARC)专著(2012年)中，有13种高风险HPV(HR-HPV)类型，包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68。HPV16和18与70%的宫颈癌病例有关，其他HR-HPV类型导致20%的宫颈癌[11]。低风险HPV(LR-HPV)类型包括HPV6、11、42、43和44，已知与增生性病变相关，如生殖器疣。特定类型的HPV的致癌潜力突出了不同HPV分离株的检测和分型的重要性。HPV检测的结果对宫颈病变及部分外阴阴道疾病具有重要的预后判断和治疗意义，为临床医生决定每个患者最合适的治疗方案提供了有价值的信息。

3.1 HPV亚型分布特点我们3年里对35993名就诊妇女进行的调查中，HPV总阳性率为12.62%，每年总HPV感染率相似，但多重感染例数在增加。以HR-HPV感染为主，最常见的5种HR-HPV分别为52、16、58、39、53。我们的HR-HPV感染总体频率为13.3%(4788/35993)，这与四川(12.6%)和天津(12.5%)的报告频率相似[9，12]，但是低于上海(31.8%)[13]的报告频率。我们较低的感染率可能与我们筛查的女性多数是常规体检就医而不是住院病人，住院病人可能表现出更高的HR-HPV患病率。

在过去的几十年中，细胞学普查在宫颈癌筛查中起到重要作用，但是假阴性患者可能得不到及时诊治。特别在医疗资源欠缺地区或者基层医院，以HPV检测做为宫颈癌的初筛手段更具有现实意义[14]。潜伏期、亚临床感染期都可以检测到HPV，但是每个地区HPV感染亚型并不一致，例如亚洲HPV16型是分布最广的型别，感染率为54.1%， 其次为HPV18，HPV58，分别为14.6%、8.1%[15]。HPV-52和HPV-58在台湾也很常见[16]。本组数据中HPV52占阳性比例最高，达23.26%，其次HPV16为11.73%。因此，对本地区感染亚型分布特点充分了解，对阻断疾病的进展具有重要意义。

3.2 HPV感染年龄分布特点

HPV感染在不同地区具有显著的年龄特征[17]。深圳地区HPV相关的研究有显示HPV感染随年龄增加有上升趋势[18]。本研究中感染率位居前4位的分别是(≤25)岁组37.14%、(>60)岁组18.88%、(51-60)岁组13.9%和(26-30)岁12.42%，表明深圳罗湖区女性宫颈HPV感染的高峰在年龄的“两头”和“两尾”，并不完全在性活跃期。一项以社区为基础的对10602名台湾妇女的调查显示，60-65岁的妇女中HPV感染率最高(20.1%)[19]。我们推测小于30岁的感染率高与不稳定的性伴侣有关；而老年人因宫颈癌筛查参与率较低，且大部分参与筛查者多有生殖道症状，故阳性率较高。然而，这些结果与来自日本的研究中关于感染率随年龄下降的报告形成了对比[20]。这些差异可能反映了种族差异。本研究在单一感染构成比中(≤25)岁组最高(88.46%)；在多重感染构成比中(>60)岁组最高(29.68%)，这可能与老年人免疫力降低，对病毒清除力减弱有关。

3.3 HPV亚型之间关系

本次研究发现本地区妇女HPV感染者中，多重感染构成比为16.97%，稍高于全国的平均水平14.3%[21]，同时也显示了多重感染以二重感染和三重感染为主，并且以高危的多重感染为主，高危-高危型占83.66%，高危-低危混合型占15.30%，这稍高于武汉报道[22]的HR-HR和HR-LR，分别占60.52%、38.77%。因多重感染干预较为困难，故HPV多重感染可能增加持续感染的风险。有报道提示，两种或两种以上HR-HPV类型的存在与细胞学异常相关[23]。这可能是病毒负载效应。本研究也比较了不同HPV亚型引起的单一感染与多重感染的比例，发现该比例在排名前5位的高危HPV亚型相似，如高危型中的52型、16型、58型、39型和53型，这可能与病毒各亚型之间相互作用有关。在低危型中的CP8304中引起单一感染与多重感染的比例最高，为11。如此高的比例可能与大于三重感染时登记不详，漏登有关。