抗菌肽裂解法联合环介导等温扩增技术检测尿沙眼衣原体的研究

苏真娟,王梦涛

(盘锦市中心医院 检验科微生物室,辽宁 盘锦124010)

沙眼衣原体是一种传播广泛的胞内寄生病原体，最常见于有不洁性生活史的青年人[1]。由于感染者初期多无症状，使得沙眼衣原体感染的诊断较为困难[2]。为避免其引起的附睾炎和前列腺炎进而影响男性生育功能，对沙眼衣原体感染的早期诊断变得十分重要[3]。目前诊断沙眼衣原体感染的金标准是基于PCR的核酸扩增技术，尽管该技术具有高度的特异性和敏感性，但耗时长，需要复杂和昂贵的实验室设备[4]。环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification，LAMP)是一种新型、高灵敏度和特异性的诊断工具，其易于操作且耗时短，不需要复杂和昂贵的PCR热循环仪，已成为新一代具有潜力的诊断方法[5]。然而，尿液标本的检测需要事先裂解并从病原体中提取RNA，目前病原体细胞裂解液制备技术大多复杂而耗时，并且需要完全集成的自动化平台[6]。近年的研究表明抗菌肽作为一种非常有效的支原体裂解剂，可在等温扩增前作为快速有效的样品制备剂[7]。因此，本研究拟将LAMP技术与抗菌肽裂解法相结合，从而快速、灵敏地检测人尿中的沙眼衣原体。

1 研究方法

1.1 临床标本采集选取盘锦市中心医院2019年12月至2020年06月接受尿液衣原体检测的患者100例，患者年龄18-33岁，女性44例，男性56例，排除抗生素使用史及细菌感染患者，由患者自行收集清晨第一次尿液样本20-25 ml到清洁聚丙烯小皿中，并且在1天内接受检测。根据我院常规采用沙眼衣原体(CT)/淋球菌(NG)质控试剂盒(罗氏诊断产品(上海)有限公司)以定量PCR法检测沙眼衣原体感染。……