miR-20b-5p靶向调控Cyclin D1对NSCLC细胞生物学行为的影响

刘彦军，姚四清，李毅

运城市中心医院胸外科，山西运城044099

肺癌是临床常见的呼吸系统恶性肿瘤，也是恶性肿瘤死亡的主要原因［1］。非小细胞肺癌（NSCLC）是肺癌最常见的病理类型，占肺癌总数的80%以上，其预后较差，5年生存率较低［2］。但目前NSCLC发病的分子机制尚不完全清楚。miRNA是一类由18～25个核苷酸组成的小分子非编码RNA，能够通过与靶基因3′非翻译区（3′UTR）互补结合，在转录后或翻译水平上负调控基因表达。miRNA功能异常是恶性肿瘤发生的重要因素。miRNA可作为癌基因或抑癌基因，参与恶性肿瘤的发生、发展。许多研究证实，miRNA能够通过调控细胞增殖、分化、迁移等生物学行为，参与NSCLC的发生、发展［3-5］。细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）是细胞周期的重要调节剂，通常在恶性肿瘤组织中过表达，是恶性肿瘤表型和疾病进展的生物标志物［6-7］。XIA等［8］研究发现，在乳腺癌细胞中miR-20b-5p异常表达，其异常表达可能通过调控Cyclin D1和E2F转录因子1表达，促进乳腺癌干细胞恶性生物学行为，提示miR-20b-5p可能通过靶向调控Cyclin D1参与乳腺癌的发生、发展。但在NSCLC细胞中miR-20b-5p与Cyclin D1的关系尚不明确。2019年6月—2020年12月，本研究观察了miR-20b-5p靶向调控Cyclin D1对NSCLC细胞生物学行为的影响及其作用机制。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 NSCLC细胞系A549、H1975、PC-9（以下称A549、H1975、PC-9细胞）及人正常肺上皮细胞BEAS-2B（以下称BEAS-2B细胞），购自中国科学院上海细胞生物学研究所。miR-20b-5p模拟物（miR-20b-5p mimic）及其阴性对照物（miR-NC）、Cyclin D1干扰质粒（si-Cyclin D1）及其阴性对照质粒（si-NC），由北京华大基因研究中心有限公司设计合成。所有引物序列由武汉金开瑞生物工程有限公司设计合成。……