一种金黄色葡萄球菌快速MPN检测法及其方法比对研究

金黄色葡萄球菌是常见的食源性致病菌之一，由其引发的食物中毒事件屡见不鲜，国家食品安全标准《GB 29921-2013》将其列为食品中最常见的五种致病菌之一，并要求使用平板计数法（涂布法）进行检测。然而实际工作中往往会遇到一种情况，当样品中目标菌浓度很低而背景菌浓度很高，低稀释倍数下其目标菌会被大量的背景菌覆盖，导致后续无法挑取目标菌菌落，而若提高稀释倍数，则无法培养出目标菌落。此时，MPN计数法更能够准确地反映出此类样品中金黃色葡萄球菌的污染程度，因为MPN体系拥有高数量的平行管、小于十倍的稀释倍数、更适宜的生长条件以及便于解释和弥补的重复误差。不过，国标中的MPN计数法也有其不足之处。第一，划线分离和挑取可疑菌落的工作量大，划线分离一个样品就需要划9块BP平板，倘若有可疑菌落，每块BP平板又需要挑5个可疑菌落做确认实验，等于一个样品最多要做45个兔血浆凝固酶实验。第二，仅仅9管的MPN法，其准确性受到限制。MPN法的准确性取决于做的管数，管数越多，准确性就越高，但增加管数也就意味着更多的工作量、更高的检测成本，这可能就是“限量标准”中不使用MPN法的原因之一。

本文介绍了一种快速的金黄色葡萄球菌MPN检测法（以下简称“快速MPN检测法”），可以大幅缩短检测周期，节约企业检测成本，还可以提高检测准确性。

一、材料

7.5%Nacl肉汤，广东环凯;1%亚碲酸钾溶液，青岛海博;兔血浆（RPFA）纤维蛋白原琼脂，Bioker;Baird-Parker（BP）琼脂，广东环凯;冻干兔血浆，广东环凯;脑心浸出（BHI）液肉汤，青岛海博;96方孔板，2.2ml;金黄色葡萄球菌菌种，CICC 21600。……